棉屬植物一鋅結合蛋白(ZnBP)基因的克隆、表達及功能初探.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩69頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、棉酚(Gossypol)不僅是棉屬植物體內一種重要的抗性物質;也是醫(yī)藥上具有重要應用價值的天然物質，具有重要的男性抗生育、抗腫瘤、抗病毒等作用。為了有效調控這一重要的次生代謝產物，人們長期致力于棉酚及其儲藏器官-色素腺體(Pigment gland)的研究。
　　從已構建完成的棉花色素腺體形成時期的cDNA均一化文庫中篩選出一個棉花鋅結合蛋白(Zinc binding protein-ZnBP)基因的全長cDNA序列。經過克隆，測

2、序及序列分析，發(fā)現該片段包含一個完整開放閱讀框，長654個堿基，編碼217個氨基酸，蛋白分子量大小為24.6kD，等電點為9.33。推導的氨基酸序列(EU372997.1)與擬南芥鋅結合蛋白(EFH46337.1)氨基酸序列同源性高達77％。以湘棉-18葉片基因組DNA為模板，通過聚合酶鏈式反應(PCR)擴增分離獲得棉花ZnBP基因的基因組序列。經測序分析，得到1731bp的棉花gDNA片段，編碼區(qū)以ATG啟動子開始緊接著一個內含子，其

3、中編碼區(qū)含有3個內含子。以pET-28a(+)為原核表達載體，大腸桿菌BL21(DE3)為宿主表達菌，在37℃，IPTG終濃度1mmol/L，誘導時間8h，轉速150r/min條件下，實現最優(yōu)表達;并通過SDS-PAGE凝膠電泳及Western Blotting檢測分析表明蛋白表達正確。以pCAMBIA2300-35S-OCS為載體，構建pCAMBIA2300-ZnBP超表達載體，并用凍融法轉化GV3101感受態(tài)農桿菌。農桿菌侵染法將Z

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論