GX-50對(duì)淀粉樣蛋白誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響.pdf

1、小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要的免疫細(xì)胞，在阿爾茲海默癥（Alzheimer’s disease,AD）的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著非常重要的作用。淀粉樣蛋白沉積形成的老年斑是AD特征性病理表現(xiàn)之一，其主要成分β-淀粉樣蛋白（β-amyloid,Aβ）可以激活小膠質(zhì)細(xì)胞，激活后的小膠質(zhì)細(xì)胞可吞噬和清除Aβ或Aβ-Aβ受體復(fù)合物，降低Aβ對(duì)神經(jīng)元的損傷，同時(shí)也可以釋放出大量的炎性介質(zhì)等毒性物質(zhì)，從而引起神經(jīng)元損傷，促進(jìn)AD的發(fā)展。隨著對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞

2、參與AD發(fā)生發(fā)展過(guò)程的深入認(rèn)識(shí)，以小膠質(zhì)細(xì)胞為靶標(biāo)，針對(duì)抑制其激活以及炎性因子的產(chǎn)生，或在細(xì)胞表面受體中尋找新靶點(diǎn)以提高清除Aβ能力的研究已成為AD防治藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域的熱點(diǎn)。
　　研究目的：
　　GX-50是從花椒中提取的一種有效成分，通過(guò)藥物軟件分析發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)能夠激活α7煙堿型乙酰膽堿受體。我們的前期實(shí)驗(yàn)探討了GX-50對(duì)淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞損傷的影響，發(fā)現(xiàn)GX-50能夠和大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞表面的α7煙堿型乙酰膽堿

3、受體結(jié)合,有效抑制Aβ誘導(dǎo)的皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡,并能夠抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞釋放炎性因子。本研究目的是探討GX-50對(duì)Aβ誘導(dǎo)的大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響。
　　研究方法：
　　根據(jù)配體和其受體結(jié)合親和力的大小，我們選用了不同濃度的Aβ和GX-50處理大鼠原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞，MTT和LDH法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞活性的影響。用受體結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GX-50與小膠質(zhì)細(xì)胞表面α7煙堿型乙酰膽堿受體的結(jié)合能力。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和

4、細(xì)胞因子蛋白芯片檢測(cè)GX-50預(yù)處理后對(duì)淀粉樣蛋白誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞分泌炎性因子的影響。
　　結(jié)果：
　　MTT和LDH檢測(cè)的結(jié)果顯示1×10-8～10-4M的GX-50,10～50μM的Aβ對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的活性沒(méi)有顯著影響。并且GX-50可以競(jìng)爭(zhēng)性地與小膠質(zhì)細(xì)胞表面的α7煙堿型乙酰膽堿受體結(jié)合。根據(jù)使α7煙堿型乙酰膽堿受體激動(dòng)劑尼古丁和其受體達(dá)到最大親和力時(shí)的最低濃度，我們選取了1×10-6M的GX-50預(yù)處理胞，然后再加入Aβ