CX3CR1 antibody對(duì)脛骨癌痛大鼠痛行為學(xué)及脊髓膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:研究鞘內(nèi)注射(intrathecal injection,i.t.)CX3CR1 antibody對(duì)脛骨癌痛大鼠疼痛行為學(xué)、腫瘤生長(zhǎng)及脊髓背角膠質(zhì)細(xì)胞增殖活化的影響。
   方法:采用Walker256乳腺癌細(xì)胞注入大鼠脛骨骨髓腔構(gòu)建脛骨癌痛模型。雌性SD大鼠(150~180g)隨機(jī)分為五組:假手術(shù)組(Ⅰ組)、假手術(shù)+CX3CR1 antibody12gg組(Ⅱ組)、骨癌痛組(Ⅲ組)、骨癌痛+control IgG組(Ⅳ組

2、)、骨癌痛+CX3CR1antibody12μg組(Ⅴ組)。于手術(shù)當(dāng)天和術(shù)后第一、二天,每天給藥1次,分別于術(shù)前1d、術(shù)后1d、3d、5d、7d、9d、11d、14d、21d,測(cè)定大鼠機(jī)械痛敏、熱痛敏及自發(fā)性疼痛評(píng)分;HE染色觀察腫瘤骨的骨質(zhì)破壞程度;Westem blot法測(cè)定脊髓CX3CR1蛋白的表達(dá);免疫熒光化學(xué)法檢測(cè)脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物離子鈣接頭蛋白分子-1(Iba-1)及星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)來(lái)觀察

3、脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖活化情況。
   結(jié)果:(1)疼痛行為學(xué):與Ⅰ組相比,脛骨癌痛組大鼠在術(shù)后5天左右出現(xiàn)機(jī)械痛覺過(guò)敏(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組),第7天出現(xiàn)自發(fā)性疼痛評(píng)分升高(Ⅲ、Ⅳ組)(P<0.01),Ⅱ組上述指標(biāo)無(wú)明顯差別(P>0.05)。與Ⅳ組比較,V組鞘內(nèi)注射CX3CR1 antibody12μg后能明顯提高癌痛大鼠的機(jī)械痛覺閾值,降低自發(fā)性疼痛評(píng)分(P<0.05,P<0.01),Ⅲ組上述指標(biāo)無(wú)明顯差異(P>0.05

4、)。各組之間熱縮足潛伏期未見明顯的差異(P>0.05)。(2)脛骨HE染色觀察骨質(zhì)破壞程度:術(shù)后21d癌痛各組(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組)內(nèi)腫瘤細(xì)胞增生活躍并侵犯周圍組織。Ⅰ、Ⅱ組未見骨質(zhì)破壞。(3)Westernblot:與假手術(shù)組相比,術(shù)后7d、14d、21d癌痛大鼠CX3CR1表達(dá)上調(diào)(P<0.01)。(4)免疫熒光化學(xué)法:與Ⅰ組相比,骨癌痛大鼠(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組)脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量明顯增加,胞體突起增生肥大,呈激活狀態(tài),Iba

5、-1、GFAP平均光密度(mean optical density,MOD)值顯著增加(P<0.05,P<0.01)。與Ⅳ組相比,鞘內(nèi)注射CX3CR1 antibody能明顯抑制癌痛大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化,降低MOD(P<0.05,P<0.01)。
   結(jié)論:1.鞘內(nèi)注射趨化因子CX3CL1受體CX3CR1 antibody,能夠延遲骨癌痛大鼠痛覺過(guò)敏的產(chǎn)生,減輕已形成的痛覺過(guò)敏,但對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)及組織破壞程度無(wú)

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