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文檔簡介
1、目的:研究P38MAPK抑制劑SB203580在人肝癌細胞系HepG2細胞缺氧再灌注過程中細胞增殖、遷移、侵襲和凋亡能力的作用,以及在人正常細胞系LO2細胞缺氧再灌注過程中細胞增殖和凋亡能力的作用。
方法1,四甲基偶氮唑藍比色(MTT)法測定不同藥物濃度及缺氧時間該藥物對HepG2細胞及LO2細胞增殖的影響;2,分別使用0.5μmol/L和0.1μmol/L的SB203580培養(yǎng)HepG2細胞及LO2細胞,Annexin V-
2、FITC/PI雙染實驗檢測細胞凋亡率的變化。3,分別應用Western Blot、劃痕實驗、Transwell實驗檢測HepG2細胞中P38蛋白表達情況和細胞遷移、侵襲的變化。
結果:與正常培養(yǎng)細胞組相比,缺氧培養(yǎng)組HepG2細胞的凋亡率、P38MAPK磷酸化水平增加;SB203580+缺氧培養(yǎng)組 HepG2細胞的凋亡率相對于缺氧培養(yǎng)組增加,P38MAPK磷酸化水平降低;劃痕實驗48 h后,缺氧對照組HepG2細胞明顯向劃痕的
3、中央遷移,而 SB203580+缺氧培養(yǎng)組 HepG2細胞遷移受到抑制;侵襲實驗24 h后,SB203580+缺氧培養(yǎng)組 HepG2細胞的侵襲能力較缺氧對照組降低(P<0.05);AnnexinV-FITC/PI雙染實驗顯示與缺氧對照組相比,LO2細胞SB203580+缺氧培養(yǎng)組凋亡率降低,而 HepG2細胞 SB203580+缺氧培養(yǎng)組凋亡率則增加(P<0.01);MTT結果顯示實驗組 HepG2細胞和LO2細胞增殖抑制率受到影響,并
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