2型豬鏈球菌葡萄糖酸-5-脫氫酶晶體結構和功能研究.pdf

1、豬鏈球菌病，是一種人畜共患傳染病。每年對養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經濟損失，尤其是1968年丹麥首次報道了人體感染豬鏈球菌導致腦膜炎的病例，更加引起人們的重視。目前全球有200余例豬鏈球菌感染病例報告。 豬鏈球菌根據(jù)熒膜多糖分類，可以分為35個血清型，其中2型豬鏈球菌是頻繁感染人和豬的血清型。2型豬鏈球菌基因組現(xiàn)已測序完畢，基因YP_001198591注釋為編碼葡萄糖酸-5-脫氫酶(gluconate 5-dehydrogenase，Ga

2、5DH)，該酶屬于一種短鏈脫氫酶類家族。Ga5DH可催化葡萄糖酸(gluconate)和5-酮基葡萄糖酸(5-ketogluconate)之間的可逆轉變，從而調節(jié)體內的碳源和再生NADP，維持機體內的代謝平衡。這種糖酸的分解利用對豬鏈球菌定殖于宿主組織起著至關重要的作用。當宿主組織只提供來源有限的糖酸時，對D-葡萄糖酸的分解作用的能力將直接決定鏈球菌的存活及增殖。理解這種糖酸降解的詳細作用機制，如糖酸分解酶的結構、作用過程等，設計相對應

3、的抑制劑，對于預防和治療鏈球菌感染的疾病將極具理論價值。 本研究以2型豬鏈球菌葡萄糖酸-5-脫氫酶為研究對象，對基因利用生物信息學的方法初步確定所編碼蛋白，利用基因體外重組技術并在大腸桿菌中表達獲得較大量葡萄糖酸-5-脫氫酶，通過對葡萄糖酸-5-脫氫酶(gluconate5-dehydrogenase，Ga5DH)進行結晶篩選和優(yōu)化獲得質量較好的晶體；進行X射線衍射實驗，獲得X射線衍射數(shù)據(jù)；利用相關軟件解析了其三維精細結構，并通