地衣芽孢桿菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆及其在乳酸乳球菌中的表達研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、β-葡聚糖酶的消化作用可促使飼料中β-葡聚糖的降解,從而在一定程度上消除其抗營養(yǎng)作用,提高飼料中營養(yǎng)成分的利用率。β-葡聚糖酶作為添加劑和對青貯飼料處理的研究及應用發(fā)展很快,范圍也越來越廣。經(jīng)過大量實際應用,已普遍為飼料界所接受。目前在飼料工業(yè)中使用的酶制劑基本上是由大腸桿菌等微生物發(fā)酵產(chǎn)生的,發(fā)酵結(jié)束后需要將含酶發(fā)酵液經(jīng)過一系列后處理操作,分離,加工成干物質(zhì)才能應用于飼料生產(chǎn)中。這樣工序繁雜,費時費力。若將β-葡聚糖酶在一個食品級宿主

2、菌例如乳酸菌中進行表達,則不需進行酶制劑的發(fā)酵生產(chǎn)、分離和添加過程即可直接加入飼料中。 本實驗首先利用PCR方法從地衣芽孢桿菌中克隆到β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因并測序,將該基因序列與其他地衣芽孢桿菌β-葡聚糖酶進行blast比對,分析其相互間的同源性。再將該基因與大腸桿菌表達載體pET32a進行連接,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21,得到了有效的表達。確定β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因產(chǎn)物具有生物活性后,構建乳酸乳球菌表達載體pMG

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