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文檔簡介
1、目的:檢測破骨細胞分化因子在佐劑性關節(jié)炎大鼠滑膜中表達的變化,探討其表達在破骨細胞活化及關節(jié)破壞的作用,并探討應用骨保護素對關節(jié)炎大鼠關節(jié)的保護作用及其可能機制。 方法:用完全弗氏佐劑免疫SD大鼠,誘發(fā)佐劑性關節(jié)炎,在免疫O、3、7、14、21、30、40天后,立即取下膝關節(jié)滑膜,采用半定量RT—PCR和免疫組織化學法檢測大鼠滑膜組織中破骨細胞(ODF)的表達,用定量RT-PCR檢測滑膜中破骨細胞標志物:抗酒石酸酸性磷酸酶(TR
2、AP)和組織蛋白酶K(CathepsinK)的表達的變化,并用TRAP酶組織化學染色測定滑膜中活化破骨細胞的數量,同時行HE染色觀察關節(jié)破壞情況。將致炎的關節(jié)炎大鼠隨機分為兩組,一組行膝關節(jié)腔內注射骨保護素(OPG),一組注射IgG,,每一周注射一次,3周后,用半定量RT一PCR檢測兩組大鼠滑膜中TRAP和CathepsinK的表達情況,用TRAP染色計數滑膜中活化破骨細胞的數目,HE染色觀察滑漠炎癥、關節(jié)破壞情況。 結果:關節(jié)
3、炎大鼠滑膜中ODF、TRAP、組織蛋白酶K在mRNA水平隨免疫時間逐漸升高,ODF的表達水平與TRAP、組織蛋白酶K的表達水平成正相關;組化染色顯示,在滑膜的襯里層、滑膜一軟骨交界處有ODF的表達,且表達的強度隨免疫時間逐漸升高,TRAP染色可見在滑膜一軟骨交界處有大量TRAP+細胞,ODF的表達強度與!TRAP+細胞的數目以及關節(jié)破壞的程度成正相關。注射OPG的AA大鼠組關節(jié)破壞程度上低于注射IgG1的從大鼠組(P 4、P6的從大鼠滑膜中TRAP+細胞數目明顯低于注射IgG1的從大鼠組(P<0.01);注射OP6的從大鼠滑膜中ODF的表達、炎性細胞浸潤程度、血管翳數量與注射IgG。的從大鼠組無顯著性差異(P>0.05) 結論: 1佐劑性關節(jié)炎大鼠滑膜組織ODF的表達隨滑膜炎癥和疾病的嚴重度而增強,提示ODF可能在關節(jié)炎大鼠關節(jié)破壞病理機制中起重要作用。 2炎癥滑膜可能通過ODF的表達而激活滑膜中破骨及前體細胞,進而引起關節(jié)的破壞
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