

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文神經生長因子誘導人神經母細胞瘤細胞分化的實驗研究姓名:折曉寧申請學位級別:博士專業(yè):癌細胞分子病理學指導教師:陳杰19990701體在IMR32細胞系中恢復表達之后,轉化細胞系對NGF誘導分化的反應,以及進—步恢復高和低兩種親和性神經生長因子受體同時表達后,雙重轉化細胞系對NGF誘導分化的反應及適時撤藥后細胞的生存狀態(tài)。/f我們首先利用基因重組技術,構建了表達高親和性神經生長因子受體基\、因trkA的逆轉錄病
2、毒載體,經雙向包裝細胞系PA317包裝后,病毒上清感染I積一32細胞,經篩選得到抗性克隆,擴大培養(yǎng)后,經Southernblot,RTPCR及流式細胞分析術,證實有外源基因的整合與穩(wěn)定表達,轉化細胞經NGF誘導出現(xiàn)了明顯的分化反應,而未轉化的母系及空病毒轉化細胞系均未見分化反應,同時作為平行對照的低親和性神經生長因子受體轉化細胞系對NGF誘導僅有輕微的分化反應;高親和性神經生長因子受體轉化細胞系在出現(xiàn)明顯分化之后,撤去NGF,細胞繼續(xù)維
3、持分化狀態(tài)不再回到原來非分化的幼稚狀態(tài),細胞惡性表型得到較為完全的逆轉;但未誘導分化的細胞則仍繼續(xù)增殖。進而我們又構建了與外源trkA表達載體篩選標記不同的低親和性神經生長因子基因的表達載體,并同時轉化IMR32細胞系,通過雙藥物篩選,獲得了雙抗性克隆,培養(yǎng)后,經RTPCR及流式細胞術證實,雙重轉化細胞中含有高和低兩種親和性神經生長因子受體的表達,繼而進行NGF誘導分化實驗及撤藥后細胞生存狀態(tài)觀察并與分別轉有兩種神經生長因子受體的單獨轉
4、化細胞系及母系進行對照。結果表明,雙重轉化細胞系在NGF誘導下較trkA單轉細胞系更快出現(xiàn)神經元樣分化,軸突生長數(shù)量更多,分化高峰時間較單轉細胞明顯提前,在轉化細胞明顯分化之后撤去NGF,雙重轉化細胞系中NGF誘導分化的細胞在撤藥35天后大量凋亡,對NGF生存依賴性明顯上升,而trkA單轉細膨E/f4B后對NGF不產生生存依賴,撤去NGF之后仍然維持分化狀態(tài),在有限的觀察期內未見分化逆轉,也未見明顯的凋亡細胞產生,低親和性神經生長因子受
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 轉神經生長因子基因誘導神經母細胞瘤分化的研究.pdf
- 體外誘導人臍帶間充質干細胞、神經生長因子轉染及向神經上皮祖細胞分化的實驗研究.pdf
- 黃芪聯(lián)合生長因子誘導人臍帶間充質干細胞分化為神經細胞的實驗研究.pdf
- 神經母細胞瘤腫瘤干細胞的培養(yǎng)、鑒定及誘導分化研究.pdf
- RNA干擾下NGF誘導神經母細胞瘤分化的研究.pdf
- 神經生長因子對神經干細胞增殖、分化和凋亡的影響.pdf
- 33484.維甲酸對人神經母細胞瘤sknsh細胞的誘導分化作用及其機理研究
- 小劑量阿糖胞苷體外誘導神經母細胞瘤SMs-KCNR細胞分化的研究.pdf
- 腎上腺神經母細胞瘤
- NT3聯(lián)合轉化生長因子β誘導骨髓基質細胞分化為神經元樣細胞的實驗研究.pdf
- 神經生長因子對螺旋神經節(jié)細胞保護作用的實驗研究.pdf
- 維甲酸誘導神經母細胞瘤分化的蛋白質組學研究——Cyclophilin A在神經分化中的作用.pdf
- GM1聯(lián)合生長因子誘導人骨髓間充質干細胞分化為神經元樣細胞的研究.pdf
- 神經母細胞瘤王婷婷
- C6膠質瘤細胞誘導神經干細胞分化的實驗研究.pdf
- 體外誘導人臍帶間充質干細胞分化的神經樣細胞表達細胞紅蛋白及血管內皮生長因子的情況.pdf
- 神經干細胞及神經生長因子對內耳作用的研究.pdf
- 神經生長因子對EAE大鼠腦神經干細胞增殖及向星形膠質細胞分化的影響.pdf
- 臍血單核細胞體外誘導分化樹突狀細胞及其對神經母細胞瘤細胞的殺傷效應研究.pdf
- 神經母細胞瘤中Trks基因的表達及K252a對神經母細胞瘤細胞的作用.pdf
評論
0/150
提交評論