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文檔簡介
1、背景/目的:胰腺癌的發(fā)病率和死亡率逐年升高,目前排名腫瘤導致死亡因素第四位,據(jù)統(tǒng)計每年約有227,000人死于胰腺癌。由于胰腺癌早期難以發(fā)現(xiàn),導致手術切除率和預后也遠遠低于其它腫瘤,因此針對胰腺癌的抗腫瘤免疫研究逐漸成為大家關注的熱點。相關研究發(fā)現(xiàn),調(diào)節(jié)性T淋巴細胞(Foxp3+Treg細胞)能抑制相關T淋巴細胞的功能,如CD8+毒性T淋巴細胞等,從而導致腫瘤細胞逃避免疫監(jiān)視。目前僅有少部分文獻運用流式細胞儀技術報道了 Treg細胞在胰
2、腺導管腺癌患者外周血單核細胞中的頻率以問題,但很少有相關研究詳細探討并分析Treg細胞可能在胰腺導管腺癌腫瘤微環(huán)境中對相關T淋巴細胞的影響以及Treg細胞的表達和分布與胰腺導管腺癌分化、預后的關系。在本研究中,我們將闡述胰腺導管腺癌微環(huán)境中Treg細胞的表達與相關T淋巴細胞亞群及腫瘤分化、預后的關系。
材料及方法:從2007年1月到2012年1月總共有228名在西南醫(yī)院治療的胰腺導管腺癌患者和15名對照樣本被納入本研究。其中4
3、5名胰腺導管腺癌患者的外周血及腫瘤組織被收集。通過流式細胞儀檢測外周血和腫瘤微環(huán)境中 Treg細胞,CD4+ T淋巴細胞及CD8+ T淋巴細胞的頻率。此外收集了183名胰腺導管腺癌的組織樣本,通過連續(xù)石蠟切片運用免疫組化的方法分析了Foxp3, CD4和CD8等細胞因子的表達。最后運用t檢驗,卡方檢驗,相關性分析,生存曲線等研究T淋巴細胞亞群在胰腺癌組織中的頻率、分布、相關性以及和胰腺癌進展、預后的關系。
結果:通過流式細胞儀
4、檢測發(fā)現(xiàn),與作為對照的正常胰腺組織比較,胰腺導管腺癌微環(huán)境中和外周血單核細胞中的Treg細胞,CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞的頻率均明顯增高。但健康對照樣本的外周單核細胞與胰腺癌患者外周單核細胞中的Treg細胞,CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞表達頻率沒有明顯差別。相應地,在胰腺導管腺癌微環(huán)境中,Treg細胞和CD4+ T淋巴細胞的表達頻率呈正相關,而Treg細胞和CD8+ T淋巴細胞的表達頻率呈負相關。同時通過流式細胞儀
5、技術研究發(fā)現(xiàn), Treg細胞的表達和胰腺導管腺癌的分化程度密切相關。運用免疫組化染色研究發(fā)現(xiàn),在胰腺導管腺癌腫瘤為環(huán)境中,Treg細胞的表達主要分布于胰腺癌細胞周圍的間質(zhì)區(qū)域并高于遠離胰腺癌細胞的外周間質(zhì)區(qū)域。相反的,CD8+T淋巴細胞則主要集中表達位于遠離胰腺癌細胞的外周間質(zhì)區(qū)域而腫瘤周圍間質(zhì)區(qū)域表達較少。最后我們發(fā)現(xiàn)胰腺導管腺癌患者較高的腫瘤分化程度和較早的腫瘤分期以及高表達的CD8+ T淋巴細胞與良好的生存率密切相關,而較高表達的
6、 Foxp3+ T淋巴細胞的表達與預后不良相關,并且Foxp3+T淋巴細胞的表達是一個導致預后不良的獨立因素。
結論:在胰腺導管腺癌腫瘤微環(huán)境中,CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞的頻率顯著增加,這些細胞的表達抑制了腫瘤相關抗原特異性的CD8+ T細胞的募集和表達。此外,增加的腫瘤浸潤Treg細胞的頻率與胰腺導管腺癌細胞的分化程度相關且提示預后不良。大多數(shù)的Foxp3+細胞被發(fā)現(xiàn)募集于低分化的胰腺導管腺癌的腫瘤細胞間質(zhì)
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