天麻素對過表達APP的APP695、293細胞中Aβ水平的影響.pdf

1、目的：
　　隨著全球性老齡化社會的發(fā)展,阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)已經(jīng)成為一個嚴重威脅人類健康的衛(wèi)生和社會問題。AD的致病核心是β-淀粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)在大腦內的沉積。β-淀粉樣蛋白(Aβ)在細胞外沉積形成老年斑(senile plaque,SP)是AD的主要神經(jīng)病理學特征之一。以此為出發(fā)點,我們探討天麻素在過表達淀粉樣前提蛋白(amyloid precursor protein

2、,APP)的細胞系中抑制Aβ分泌的作用及其作用機制,并由此探討一種治療阿爾茨海默病的新思路。
　　方法：
　　分別培養(yǎng)過表達APP的兩株細胞系293sw和APP695,加入不同濃度的天麻素,用MTT法檢測細胞的活力,并用倒置的顯微鏡觀察細胞的形態(tài),以確定有效的藥物濃度。
　　采用細胞免疫組化來觀察天麻素對兩株細胞的細胞膜穩(wěn)定性的影響。
　　收集兩株細胞的培養(yǎng)基,用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測培養(yǎng)基中Aβ

3、含量。
　　分別提取細胞中的蛋白,用Western Blot的方法對胞內APP和IDE進行檢測,觀察APP和IDE含量的變化情況。
　　收集兩株細胞的培養(yǎng)基,用TCA-DOC的方法沉淀培養(yǎng)中Aβ,用Western Blot方法檢測其含量的變化。
　　結果：
　　通過上述的實驗,我們發(fā)現(xiàn),濃度在25-200 umol/l的天麻素對細胞沒有造成細胞的死亡,與對照組相比,細胞的活力增強,各組細胞在24 h和48 h時貼

4、壁良好,軸突較長,有樹狀分支,胞體和突起折光率好;與對照組相比,無胞體形態(tài)變化,軸突回縮,貼壁不良,細胞懸浮。
　　ELISA和Western Blot實驗顯示,兩株細胞中隨著天麻素的濃度增加,培養(yǎng)基和胞內的Aβ含量均有明顯的下降趨勢。但胞內的IDE卻無明顯的增加。
　　結論：
　　天麻素在兩株過表達APP的293sw和APP695的細胞系中,能夠抑制胞內APP的表達,促使胞外Aβ的降解,保護神經(jīng)細胞,可能對阿爾茨海默