替米沙坦對長期HSHF膳食喂養(yǎng)大鼠內(nèi)臟脂肪組織作用的研究.pdf

1、目的：
　　1．觀察替米沙坦對長期高糖高脂（HSHF）膳食喂養(yǎng)的SD大鼠體重、胰島素抵抗程度和空腹血糖的影響。
　　2．觀察替米沙坦對長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)的SD大鼠的附睪脂肪細胞的體積，以及脂肪組織中浸潤的巨噬細胞數(shù)量和極化的影響，探討替米沙坦改善長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)的SD大鼠胰島素抵抗方面的可能的機制。
　　方法：
　　6周齡同窩雄性清潔級SD大鼠隨機分為正常對照組（8只）和實驗組（24只），正常對照組采用普通

2、飼料喂養(yǎng)36周，實驗組采用高糖高脂膳食飼養(yǎng)24周后再隨機分為3個組：高糖高脂喂養(yǎng)組（高糖高脂組、8只）、高糖高脂替米沙坦干預組（替米沙坦組、8只）及高糖高脂生理鹽水干預組（生理鹽水組、8只），高糖高脂組大鼠持續(xù)采用高糖高脂膳食飼養(yǎng)12周；替米沙坦組大鼠則采用高糖高脂飲食及替米沙坦（5mg/kg/d，溶于2ml生理鹽水灌胃）治療12周；生理鹽水組大鼠采用高糖高脂膳食及2ml生理鹽水灌胃干預12周。36周時，即實驗結束時各組大鼠全部進行實驗

3、。實驗方法：1.應用無創(chuàng)尾套加壓法測定大鼠的血壓（收縮壓與舒張壓），稱重，腹腔注射烏拉坦麻醉，開腹經(jīng)大鼠腹主動脈放血，留取血標本，置于低速離心機離心，離心機設置：3000r/min，15min，隨后分離上層血清分別裝入EP管于﹣80℃低溫冰箱凍存，同批測定下列指標：空腹血糖（FPG)、甘油三酯（TG）、空腹胰島素（FINS）。計算穩(wěn)態(tài)模型評估法胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR，HOMA-IR=FINS×FBG/22.5。2.摘除大鼠左側(cè)附

4、睪脂肪組織放入10％中性甲醛溶液中進行固定處理，隨后制作成石蠟切片，經(jīng)常規(guī)HE染色，放置于光學顯微鏡下對附睪脂肪細胞體積進行觀察；免疫組織化學的方法測定脂肪組織中巨噬細胞分子標志物CD68的表達。摘除大鼠右側(cè)附睪脂肪組織迅速投于液態(tài)氮，稍后移入﹣80℃低溫冰箱，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應法（RT-PCR）測定大鼠附睪脂肪組織中M1型以及M2型巨噬細胞分子標志物一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（arg1）的表達。
　　結果：

5、>　　1．實驗結束時，四組大鼠體重、血壓的比較
　　和正常對照組相比，高糖高脂組體重、收縮壓明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05），舒張壓趨向于升高，但在統(tǒng)計學上差異無意義（p>0.05）；與高糖高脂組相比，替米沙坦組體重、收縮壓及舒張壓均顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；高糖高脂組和生理鹽水組相比，體重、收縮壓、舒張壓差異均無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。
　　2．實驗結束時，各組大鼠FPG、TG、FINS、H

6、OMA-IR的變化
　　與正常對照組比較，高糖高脂組FPG、TG、FINS、HOMA-IR水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；與高糖高脂組相比，替米沙坦組FPG、TG、FINS、HOMA-IR水平均顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。高糖高脂組和生理鹽水組相比，F(xiàn)PG、TG、FINS、HOMA-IR水平差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。
　　3．實驗結束時，各組大鼠附睪脂肪細胞的體積變化。
　　正常

7、對照組可觀察到脂肪細胞排列規(guī)整，大小均一，體積小，圓潤；高糖高脂組可見脂肪細胞排列混亂，體積大小不均等，體積較大；與高糖高脂組比較，替米沙坦組大鼠脂肪細胞體積較小，大小均一性較好。生理鹽水組大鼠脂肪細胞體積不均一，體積較大，與高糖高脂組相似。
　　4．實驗結束時，各組大鼠附睪脂肪組織中巨噬細胞分子標記物CD68表達水平的變化。
　　和正常對照組比較，高糖高脂組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中CD68表達顯著增加（p<0.05），和高糖高脂

8、組相比，替米沙坦組大鼠內(nèi)臟脂肪組織CD68表達水平均顯著降低（p<0.05）。
　　5．實驗結束時，各組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中M1型巨噬細胞分子標志物iNOS的變化。
　　和正常組相比較，高糖高脂組脂肪組織中iNOS水平顯著增加（p<0.05）；與高糖高脂組相比，替米沙坦組iNOS表達水平均顯著降低（p<0.05）。
　　6．實驗結束時，各組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中M2型巨噬細胞分子標志物Arg1水平的變化。
　　和正常對

9、照組相比，高糖高脂組內(nèi)臟脂肪組織中Arg1表達水平明顯降低（p<0.05）；和高糖高脂組相比，替米沙坦組大鼠內(nèi)臟脂肪組織中Arg1水平均顯著上升（p<0.05）。
　　結論：
　　1.替米沙坦能夠減輕長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)大鼠的體重，降低血壓，調(diào)節(jié)其糖脂代謝，減輕胰島素抵抗。
　　2.替米沙坦可能通過減小長期高糖高脂膳食喂養(yǎng)大鼠附睪脂肪細胞的體積和其中的甘油三酯含量，以及下調(diào)脂肪組織中浸潤的巨噬細胞數(shù)量，并促進巨噬細胞向