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文檔簡介
1、研究目的:探討有氧運動是否對心肌梗死(MI)大鼠心肌細胞自噬水平產(chǎn)生影響,并進而改善心功能。
研究方法:選用雄性8周齡SD大鼠30只,隨機分為假手術組(Sham)、心肌梗死組(MI)、梗死+運動組(ME),每組10只。以冠狀動脈左前降支(LAD)結扎術構建MI模型,ME組術后1周開始運動。運動方案為:適應性運動1周后,每天10 m/min熱身10 min,然后以20 m/min運動8min,再以15 m/min運動2 min,
2、交替4個循環(huán),最后20 m/min運動8min,10 m/min運動2 min后結束。每天訓練1次,5 d/w,共訓練8w。以二維超聲心動圖檢測大鼠心臟室壁厚度、射血功能;透射電鏡觀察心肌細胞自噬體的結構和數(shù)量,RT-PCR檢測自噬相關基因ATG5、Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ的mRNA表達水平以及采用ELISA的方法檢測自噬相關基因LC3、Belcin1的蛋白表達水平。
研究結果:(1)心肌梗死手術使MI組大鼠心臟
3、心室壁變薄,射血分數(shù)(EF)與Sham組相比顯著降低(P≤0.01);有氧運動使MI大鼠的室壁厚度增加、射血功能加強,其中ME組舒張期左室后壁厚度(LVPWd)與舒張期室間隔厚度之和明顯高于MI組(P≤0.05),ME組EF比MI組明顯升高(P≤0.05)。(2)透射電鏡觀察心肌組織發(fā)現(xiàn),MI組心肌細胞損傷嚴重,細胞器結構不完整,纖維中斷比較明顯,幾乎看不到自噬小體;ME組有明顯的改善,肌纖維連續(xù)程度改善,單個視野下均可見多個自噬小體的
4、存在。(3)自噬相關基因的RT-PCR結果顯示,MI組的ATG5的mRNA水平與Sham組相比有顯著降低(P≤0.01), ME組的ATG5的mRNA水平與MI組相比有顯著升高(P≤0.01);MI組的Beclin1的mRNA水平與Sham組相比有顯著降低(P≤0.01),ME8組的Beclin1的mRNA水平與MI組相比有顯著升高(P≤0.01);MI手術使心肌組織中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值明顯降低(P≤0.01),有氧運動8周(
5、ME)使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值明顯升高(P≤0.05)。(4)自噬相關蛋白Beclin1和LC3的ELISA結果顯示,MI組血漿和心肌組織中的Beclin1水平較Sham組均有顯著降低(P≤0.05和P≤0.01),ME組血漿中的Beclin1較MI組均有明顯升高(P≤0.01),心肌組織中的Beclin1水平較MI組也有顯著升高(P≤0.01)。MI組血漿和心肌組織中的LC3水平較Sham組均有顯著降低(P≤0.01和P≤0.0
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