人甲狀旁腺激素在大腸桿菌中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、甲狀旁腺激素(PTH)是由甲狀旁腺分泌的一種重要的肽類調節(jié)激素，在機體的鈣磷代謝，骨的形成、分化和發(fā)育等相關的諸多環(huán)節(jié)中起著關鍵性作用。甲狀旁腺激素分子中含有84個氨基酸。 近年的研究表明，間歇地小劑量給予PTH可促進骨的合成代謝，因此在治療骨質疏松方面被認為是最具前景的藥物。研究表明PTH(1-34)具有與PTH(1-84)相同的生物功能。據此本研究利用基因工程生產用于治療骨質疏松癥的重組的人甲狀旁腺激素(1-34)。

2、 利用基因重組技術將人PTH(1-34)基因克隆到表達載體pThioHisA中。重組的表達載體轉化到E.coliBL21(DE3)和DH5α中，經異丙醇-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)誘導表達。得到融合表達蛋白。經條件優(yōu)化后，Western-blot分析證實得到了重組人甲狀旁腺激素rhPTH(1-34)。經硫酸銨沉淀法純化后將目的蛋白作用于3T3細胞，結果顯示該蛋白可以刺

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