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文檔簡介
1、目的:探討卡介苗(BCG)與ESAT-6激活的人外周血γδT細胞是否具有抗原提呈細胞的表型和功能。
方法:⑴用Ficoll密度梯度離心法分離人外周血單個核細胞(PBMC)后,經(jīng)尼龍毛柱法分離獲得T細胞。⑵將T細胞分別用卡介苗與ESAT-6刺激擴增γδT細胞后用流式細胞儀分選純化γδT細胞,并檢測其抗原提呈細胞表型。⑶PBMC用貼壁法制備單核細胞后,誘導培養(yǎng)分化為成熟DC細胞,用流式細胞儀檢測其成熟程度。⑷T細胞用CFSE標
2、記后分別按四種方法培養(yǎng):與結核分枝桿菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培養(yǎng);與Mtb-Sag孵育2小時后的卡介苗激活的γδT細胞共同培養(yǎng);與Mtb-Sag孵育2小時后的ESAT-6激活的γδT細胞共同培養(yǎng);與Mtb-Sag孵育2小時后的成熟DC細胞共同培養(yǎng)。⑸培養(yǎng)后檢測T細胞及CD4+T細胞的增殖情況。
結果:①卡介苗與ESAT-6激活的γδT細胞CD80、CD86、HLA-DR的表達水平都增加,且后者顯著高于前者。②卡介
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