南高叢越橘品種“V3”(Vaccinium austral)四倍體誘導(dǎo)及鑒定.pdf

1、越橘（VacciniumL.），杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬(Vaccinium)多年生灌術(shù)性植物，是原產(chǎn)北美的多年生果樹。越橘單葉互生，常為卵圓形，北方多數(shù)種落葉，部分南方地區(qū)種常綠。越橘果實顏色、大小因為品種不同而有差異;在自然條件下，越橘生長在含有豐富有機(jī)質(zhì)的微酸性土壤中。
　　 南高叢越橘原產(chǎn)美國東南部亞熱帶，喜溫暖濕潤的氣候條件，在我國黃河以南的華中、華南地區(qū)發(fā)展較多，其栽培品種較少。本試驗的南高叢越橘品種“V

2、3”二倍體材料引種重慶多年，生長迅速，抗性強(qiáng)，病蟲害少，果實品質(zhì)佳，鮮食口感好，但果實較小，產(chǎn)量受限。而多倍體植物一般生長健壯、果實巨大、抗逆性強(qiáng)，本研究試圖通過秋水仙素處理南高叢越橘品種“V3”二倍體材料，從而得到多倍體。為培育大果型南高叢越橘新品種奠定基礎(chǔ)。
　　 本試驗以南高叢越橘品種“V3”組培無菌苗作為材料，選用化學(xué)藥劑秋水仙素對越橘苗莖尖進(jìn)行四倍體誘變，研究室外生長點滴液法和離體誘導(dǎo)法兩種誘導(dǎo)方法中不同處理方式對南高

3、叢越橘品種“V3”莖尖的誘導(dǎo)效果，從而確定不同方法中秋水仙素誘變的最佳處理濃度和時間。通過形態(tài)觀察法和染色體計數(shù)對所獲得的變異株進(jìn)行倍性鑒定。獲得的變異株均為嵌合體，對其進(jìn)行分離可獲得南高叢越橘品種“V3”的四倍體植株。對經(jīng)過染色體鑒定后的四倍體植株的生物學(xué)特性、抗逆性、花青素含量與二倍體對照植株進(jìn)行差異性比較，可以為今后培育果實巨大、抗逆性強(qiáng)的越橘新品種提供理論依據(jù)。
　　 主要研究結(jié)果如下:
　　 1.在室外生長點滴

4、液法中，以秋水仙素處理南高叢越橘品種“V3”莖尖，研究結(jié)果表明:0.05％～0.20％的濃度范圍內(nèi)，越橘栽植苗莖尖對秋水仙素的敏感度較高，以0.20％秋水仙素濃度處理24h效果最好，存活率為83.33％，變異率為6.67％。
　　 2.離體誘導(dǎo)法
　　 (1)以增殖系數(shù)作為不同激素濃度增殖能力的指標(biāo)，確定最適宜的ZT激素濃度，結(jié)果表明:在改良后的WPM培養(yǎng)基中添加濃度為0.20mg/L的ZT激素，增殖系數(shù)最大為8.0。<

5、br>　　 (2)莖尖浸泡法誘變效果優(yōu)于培養(yǎng)基添加法，結(jié)果表明:浸泡法中0.10％秋水仙素濃度處理24h效果最好，變異率為16.67％，培養(yǎng)基添加法中在秋水仙素濃度為0.30％的培養(yǎng)基中處理莖尖20d，莖尖的變異率最高，為6.67％。
　　 3.經(jīng)過秋水仙素處理后植株，通過外部形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn):變異株莖桿變粗、顏色加深，新長出的莖尖周圍葉片數(shù)增加、莖尖顏色發(fā)紅、表皮毛增多、葉片變厚、葉色加深、保衛(wèi)細(xì)胞明顯增大、單位面積內(nèi)氣孔數(shù)目減

6、少、柵欄組織和海綿組織厚度增加。
　　 4.根據(jù)越橘莖桿的橫切片觀察發(fā)現(xiàn):變異株莖段表皮細(xì)胞、角質(zhì)膜、皮層厚角組織增厚;初生韌皮部與二倍體對照株相比，顯著增加。變異株的初生木質(zhì)部和髓射線數(shù)量增多，髓的面積明顯增加。變異株初生韌皮部厚度和髓直徑是二倍體植株的328％、218％。
　　 5.染色體數(shù)目計數(shù)結(jié)果表明:二倍體對照株染色體數(shù)目為24條，2n=2x=24，變異株為嵌合體植株，染色體數(shù)目既有24條也有48條，四倍體植株

7、染色體數(shù)目為48條，2n=2x=48。
　　 6.南高叢越橘品種“V3”四倍體與二倍體植株的植株葉綠素、MDA、SOD、可溶性糖、脯氨酸生理指標(biāo)比較結(jié)果顯示:四倍體植株較二倍體植株生理指標(biāo)含量方面有較顯著變化。四倍體葉綠素含量、SOD、可溶性糖、脯氨酸均高于二倍體，丙二醛低于二倍體。四倍體葉片含水量略高于二倍體。
　　 7.通過溶劑浸提法和酶提法對南高叢越橘品種“V3”四倍體與二倍體植株的葉片、莖桿進(jìn)行花青素提取。結(jié)果表