懷地黃四倍體誘導及生物學特性研究.pdf

1、INVITROPRODUCTl0NANDBIOLOGYCHARACTERISTICSRESEARCHOFAUTOTERAPLOIDSOFREHMANNlAGLUTlNOSAFHUEICHlNGENSIS(CHANETSEHIH)HSlAOADissertationSubmittedtotileGraduateSchoolofHenanNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirement

2、sfortheDegreeofMasterofScienceByWangfianjunSupervisor：ProfLiMingffunMay2012摘要懷地黃[Rehmanniaglutinosafhueichingensis(ChanetSehih)llsiao]gE我國著名的“四大懷藥”之一，產F河南溫縣、武陟等地，因長期進行營養(yǎng)繁殖導致其產量F降、品質退化t吲此培育高產、擾質、抗逆的新配種對懷地黃的生產具有重要的意義。本文對懷地

3、黃四倍體植株的誘導及鑒定、二倍體和四倍體植株的同工酶差異、抗低溫能力、大罔形態(tài)、生理、產量和品質的比較進行了系統(tǒng)的研究，結果如下：l四倍體植株的誘導。利用組織培養(yǎng)結合秋水仙索誘變技術將懷地黃植株的帶芽莖段采用秋水仙素溶液浸泡和培養(yǎng)基中添加秋水仙素兩種方法均能夠誘導出四倍體，屜佳組合方式分別是01％的秋水仙索溶液浸泡懷地黃帶芽莖段24h，誘導率為129％：在培養(yǎng)基中添加005％秋水仙素培養(yǎng)一阡地黃帶芽莖段7d，誘導率為125％。2刪倍件植

4、株的鑒定。二：倍體和凹倍伴的倍性鑒定采用南接鑒定法(染色體計數法)和『日J接舉定法(單位視野內氣孔數日、保衛(wèi)細胞大小)，均能攀定出_倍體和四倍體。結果表明，二倍體細胞染色體數為56條四倍體細胞染色體數位112條；二倍體和四倍體下表皮單位視野內氣孔下均密度分別為6600個和4920個、保n細胞長分別為24oo／ma和4356Itm、f毓衛(wèi)細胞寬分刖為8】OBm和131I“m。3二倍體和叫倍體生物學特性比較：(1)同工酶比較。比較i倍體和四

5、倍體試管苗POD和SOD同工酶發(fā)現，四倍體試管苗POD同_|_=酶譜帶比一倍體多條b港帶，a譜帶顏色加深；四倍體試管苗SOD同工酶比一倍體多條e譜帶，di普帶比倍體亮，c潛帶較二倍體暗。(2)抗低溫脅迫比較。1_E10℃／5℃(晝／夜)低溫脅迫F四倍體試管苗的相對電導率和MDA含量小于二倍體：l葉綠索古量、可溶性蛋白質臺量、POD、SOD高于二倍體。表明懷地黃四倍體試管苗能夠減少低溫對細胞的傷害，低溫抗性要高]：二倍體。(3)農藝性狀和