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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文體外誘導(dǎo)人羊膜干細(xì)胞分化為胰島素分泌細(xì)胞姓名：趙玉潔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳代雄20100501遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文體外誘導(dǎo)人羊膜干細(xì)胞分化為胰島素分泌細(xì)胞InducingDifferentiationofHumanAmnionStemCellsintoInsulinSecretingCellsinVitroAbstract：Objectives：Somaticstemcell(S
2、SC)transplantationhasreceivedmoreattentionasanewstrategyoftherayfortypeIdiabetesmellitusHumanamnionderivedstemcells(hADSCs)maybeapotentialcellsourceInthisstudy，weinducedhADSCincludinghumanamnioticmesenchymalcells(hAMCs)a
3、ndhumanamnioticepithelialcells(hAECs)todifferentiateintoinsulinsecretingcells(ISCs)invitrotoexploreapotentialnewtherapyfortypeIdiabetesMethods：@hAECsandhAMCswereisolatedfromamniotictissuewithtrypsinandcollagenase，andthep
4、henotypeoftheisolatedcellswasidentifiedbyflowcytometryandimmunocytochemicalstaining②hAECsandhAMCsweredividedintoinducedgroupandnoninducedgroupInducedgroupwastreatedinserumfreeHGDMEMwith10mMnicotinamideandN2supplementtoin
5、vestigatetheirdifferentiationintoISCsThemediumusedinnoninducedgroupWasonlysupplementedwith10％fetalbovineseiumLGDMEM③Angroupswereculturedinahumidifiedatmosphereof95％airand5％C02at37。CAt7，14and21days，theexpressionofinsulina
6、ndp2microglobulinWasdeterminedbyimmunocytochemicalstaining，whilethecontentofinsulininsupernatantwasdetectedbyradioimmunoassayandtheexpressionofInsulinandPDX一1mRNAwasdetectedbyreversetranscfiptasepolymerasechainreaction(R
7、TPCR)Results：①FreshlyisolatedhAECsshowedlowexpressionforCD44andwerepositiveforCK19，buthAMCsshowedhigherexpressionforCD44andwerepositiveforvimentinBothhAECsandhAlVlCswerenegativeforCD34andCD45②At7，14and21days，thepercentag
8、esofinsulinpositivecellsinhAECsinducedgroupswere7400a：173％，7533115％and7567士058％respectively，andthepercentagesofinsulinpositivecellsinhAMCswere7467士153％。7500100％and7433153％respectively，butinnon—inducedgroupswerenegativeBo
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