肝干細胞誘導分化為胰島素分泌細胞的研究.pdf

1、該文采用免疫組織化學、細胞培養(yǎng)、分子克隆、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯免疫吸附實驗、放射免疫等方法和技術,就近些年來干細胞領域研究的熱點問題--干細胞誘導分化為胰島素分泌細胞進行了研究,著重探討了肝干細胞在肝臟中的分布及遷徙,并從基因和化學因子兩個方面探討肝干細胞誘導分化為胰島素分泌細胞的機制.全文共分四個部分.第一部分,胎肝中肝干細胞的免疫組織化學研究.采用免疫組織化學方法顯示不同時期人胚胎肝臟的干細胞,分析肝干細胞的形態(tài)與分布特

2、點及發(fā)育過程中干細胞在肝臟中的遷移,探討肝臟的發(fā)生發(fā)育及肝內干細胞的來源.第二部分,神經中間絲蛋白Nestin在胎肝干細胞中的表達.為了進一步探討肝干細胞向著胰島素分泌細胞方向分化的可塑性,采用免疫組織化學的方法研究標記不同發(fā)育時期人胚胎肝干細胞中Nestin的表達,研究肝干細胞向著胰島素分泌細胞方向分化的可能性的同時探索肝干細胞新的表面標志蛋白.第三部分,pEGFP-PDX-1表達載體的構建.構建真核表達質粒,從基因誘導方面著手研究胰

3、腺內分泌細胞發(fā)育的關鍵基因PDX-1在肝干細胞定向分化中的調控機制,為胰島及β-細胞發(fā)育的基因調控機制的研究提供理論參考.第四部分,卵圓細胞誘導分化為胰島素分泌細胞.在充分研究肝臟內干細胞的分布和定位的前提下分離大鼠肝臟卵圓細胞,在化學誘導劑作用之下使卵圓細胞定向分化為胰島素分泌細胞,檢測誘導后肝干細胞的表型變化,研究肝干細胞的誘導分化機制,為干細胞的定向分化和干細胞誘導分化的替代療法的臨床實踐提供實驗參考.以上研究表明化學誘導劑Nic