基于“藥效-配比”關系研究開心散類方的抗抑郁作用.pdf

1、開心散類方由“遠志、人參、茯苓、石菖蒲”四味藥材組成，始載于《千金要方-卷十四》，還包括了《備急千金要方》之定志小丸、《古今錄驗》之定志丸、《醫(yī)心方》之開心散、《千金翼》之補心湯和《醫(yī)門方》之開心丸，其藥方組成完全相同而配伍比例不同，主治的描述雖有相似之處，主要有調節(jié)情志，益智、防老抗衰等功效，其實卻各有側重?！肚Ы鹨健泛汀夺t(yī)門方》之開心散主治好忘；《備急千金要方》之定志小丸及《古今錄驗》之定志丸為主治心氣不定，五臟不足，甚者憂愁悲傷

2、不樂，忽忽喜忘，朝愈暮劇，或暮愈朝發(fā)狂眩方；《醫(yī)心方》之開心散主治憂愁悲傷；《千金翼》之補心湯主治心氣不定，心痛驚悸。
　　本課題研究上述6個開心散類方即《千金要方》之開心散（開心散1)、《醫(yī)心方》之開心散（開心散2)、《千金翼》之補心湯、《古今錄驗》之定志丸、《備急千金要方》之定志小丸和《醫(yī)門方》之開心丸對慢性不可預知性溫和應激抑郁模型大鼠的行為學和抑郁癥相關指標的影響，評價比較它們的抗抑郁作用及可能的作用機制，初步闡明其抗抑郁

3、作用與配伍之間的關系。
　　本研究首先建立慢性不可預知性溫和應激（CUMS)抑郁模型，建立單胺類神經(jīng)遞質（NE、DA、5-HT)和部分氨基酸（GLU、GABA)的HPLC檢測方法，并建立類方化學成分的UPLC-Q-TOF-MSE檢測方法。比較各類方對于模型動物行為學（體重、曠場、糖水偏嗜度）的影響，評價類方的抗抑郁作用，放射免疫分析方法檢測各組動物血清HPA軸神經(jīng)遞質（CRH、ACTH、CORT)的含量，采用ELISA方法檢測各組

4、動物血清7種細胞因子（IL-1、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-a、IFN-y)的含量，比較類方對各指標的影響，以及比較各類方抗抑郁作用的差異及可能的機制；同時，本研究還采用UPLC-Q-TOF-MSE方法進行了所有類方的指紋圖譜分析，并運用Markerlynx軟件進行多元統(tǒng)計處理，對處理得到的數(shù)據(jù)進行主成分分析（PCA)和偏最小二乘法分析（OPLS-DA)，比較分析類方化學成分的差異與抗抑郁作用之間的相關性。

5、>　　CUMS抑郁模型造模前后的行為學實驗表明，與正常組相比，模型組大鼠的體重、曠場得分和糖水偏嗜度均明顯降低；模型組大鼠大腦NE、DA、5-HT和GABA明顯降低，GLU和CRH、ACTH、CORT及血清細胞因子明顯升高。
　　造模成功并給予開心散類方灌胃2周后，與模型組相比，定志小丸組動物和定志丸組動物行為學得分明顯增加。開心散2組大鼠體重明顯增加，其他類方組動物行為學改善作用不明顯。
　　與模型組動物相比，定志小丸、定

6、志丸和開心散2組大鼠海馬和皮層中NE含量均明顯升高，其他組動物大腦NE含量升高不明顯；除開心散1組動物外，其他各組大鼠皮層中DA含量均明顯升高，各組大鼠海馬中DA含量有所升高，但均無明顯統(tǒng)計學意義；定志小丸組動物海馬和皮層的5-HT明顯升高，補心湯組大鼠海馬的5-HT含量明顯升高，定志丸組大鼠皮層的5-HT含量明顯升高，其他組大鼠大腦中5-HT含量升高不明顯。
　　與模型組動物相比，定志小丸組大鼠海馬和皮層的GLU含量明顯降低，開

7、心散2組大鼠海馬中GLU含量明顯降低，定志丸組大鼠皮層中GLU含量明顯降低，具有統(tǒng)計學意義，其他組大鼠大腦GLU降低均不明顯；除補心湯組和開心散2組外，其他各組大鼠海馬中GABA含量均明顯升高，除《千金翼》之補心湯組外，其他各組大鼠皮層中GABA含量均明顯升高,具有統(tǒng)計學意義。
　　與模型組動物相比，定志小丸組和定志丸組大鼠血清中CRH含量明顯降低，其他組動物血清CRH降低不明顯；除開心丸組外，其他類方組大鼠血清ACTH含量均明顯

8、降低；定志小丸、定志丸和開心散2組大鼠血清中的CORT含量明顯降低，其他組動物血清CORT含量改變不明顯。
　　與模型組動物相比，所有類方組大鼠血清中IL-1、IL-12、IFN-y、TNF-a含量均明顯降低；除開心丸組外，其他組大鼠血清IL-2均未見明顯降低；除開心散2組外，其他組大鼠血清IL-6均明顯降低；除定志小丸組外，其他類方組大鼠血清IL-10均明顯降低。
　　化學成分分析結果表明，《備急千金要方》之定志小丸和《古

9、今錄驗》之定志丸的化學成分相似，而《醫(yī)門方》之開心丸和《千金要方》之開心散的化學成分與其他類方的化學成分差異較大；采用偏最小二乘法分析（OPLS-DA)對差異性化合物進行結構鑒定，并將《醫(yī)門方》之開心丸和《千金要方》之開心散分別與《備急千金要方》之定志小丸的化學成分進行差異性比較，結果表明，《醫(yī)門方》之開心丸與《備急千金要方》之定志小丸化學成分差異較大的是人參中的6個成分和遠志中的2個成分，《千金要方》之開心散與《備急千金要方》之定志小

10、丸化學成分差異較大的是人參中的6個成分。
　　總結上述研究結果，通過行為學評分的改變和抑郁癥發(fā)病機制相關指標的檢測，提示我們《備急千金要方》之定志小丸的抗抑郁作用確切，能夠明顯改善模型大鼠的抑郁癥狀，升高模型大鼠中樞單胺類神經(jīng)遞質的含量，調節(jié)模型大鼠中樞興奮性和抑制性氨基酸的異常紊亂，抑制模型大鼠HPA軸的亢進及降低血清中細胞因子的含量；《古今錄驗》之定志丸也顯示了較好的抗抑郁作用，并且參與了抑郁癥發(fā)病機制的多個環(huán)節(jié)；其他類方的抗