黃岑苷對H2O2誘導人牙周膜細胞損傷后作用的研究.pdf

1、基于氧化應激在各種疾病中的影響，近年來國內外許多學者都致力于氧化損傷在全身疾病中作用的研究。牙周疾病是人類口腔疾病中兩大最常見的疾病之一。在我國，牙周疾病的患病率明顯高于齲病[1]。隨著患者對牙周疾病治療的需求明顯增加，對牙周疾病的病因以及損傷機制的研究報道也在增加，這對牙周疾病進行針對性的治療有著重要的臨床指導意義。最近學者們研究發(fā)現(xiàn)，牙周感染后的氧化應激（oxidative stress，OS）必然發(fā)生，而氧化損傷是導致牙周組織損傷

2、的主要因素之一[2]，但是目前針對牙周組織的氧化損傷及抗氧化作用機制卻少有研究。據(jù)分析，氧化損傷是代謝性系統(tǒng)性疾病與牙周炎之間的一個潛在的連接，兩種環(huán)境中氧化損傷產物的血清水平均有升高，這些產物都具有雙向影響性[3，4]。氧化損傷是炎癥反應的一個組成部分，所以在一般炎癥治療時不能忽視抗氧化治療，需應予以重視[5]。黃岑苷作為中藥黃岑的提取物，具有抗炎、抗菌、抗氧化等作用，已成熟用于機體其他組織的氧化損傷治療。因此，本研究以原代培養(yǎng)的人牙

3、周膜細胞為基礎，用H2O2誘導人牙周膜細胞氧化損傷，建立其氧化損傷模型，模擬人牙周膜細胞氧化損傷環(huán)境，探討中藥提取物黃岑苷在H2O2誘導人牙周膜細胞損傷后的細胞抗氧化反應和細胞毒性中的保護作用。
　　1.目的：
　　1.運用H2O2建立人牙周膜細胞氧化損傷模型。
　　2.探索黃岑苷對H2O2誘導人牙周膜細胞氧化損傷后的保護作用。
　　2.方法：
　　1.原代培養(yǎng)人牙周膜細胞(human periodonta

4、l ligament cells, hPDLCs)并鑒定。
　　2.CCK-8法檢測細胞增殖及活性，選擇適合的H2O2濃度，建立人牙周膜細胞氧化損傷模型。
　　3.采用Hoechst33342熒光染色法觀察損傷后細胞核形態(tài)。
　　4.應用流式細胞術檢測各組人牙周膜細胞對H2O2誘導的細胞毒性反應變化及黃岑苷對損傷后細胞的作用。
　　5采用分光光度計法檢測各組細胞及其上清液的LDH、MDA含量，從而闡明黃岑苷對人牙

5、周膜細胞氧化損傷后的保護作用。
　　3.結果：
　　1.H2O2引起人牙周膜細胞增殖活性下降，在H2O2濃度為200μmol/L處理細胞2h，其吸光度值與其他濃度組有差異（P<0.05）。
　　2.在H2O2濃度為200μmol/L處理細胞2h，其凋亡率與其他濃度組有差異（P<0.05）。
　　3.濃度為200μmol/L的H2O2損傷后的人牙周膜細胞經不同濃度的黃岑苷處理24h，1-10μg/ml的黃岑苷均能有

6、效的降低細胞的早期、晚期凋亡率，與其他濃度組有顯著差異（P<0.05）。
　　4.濃度為200μmol/L的H2O2損傷后的人牙周膜細胞經不同濃度的黃岑苷處理24h，1μg/ml的黃岑苷能有效的降低細胞及其上清液中LDH活性、MDA含量和漏出率，與其他濃度組有顯著差異（P<0.05）。
　　4.結論：
　　200μmol/L的H2O2可導致人牙周膜細胞凋亡率增高，同時細胞的LDH、MDA漏出率上升，造成細胞氧化損傷，建