eEElA2在前列腺癌中的高表達促進前列腺癌的增殖以及抑制凋亡.pdf

1、目的：
　　研究eEF1A2基因促進前列腺癌細胞增殖以及抑制其凋亡的作用及其可能的作用機制，為該基因在將來的前列腺癌臨床治療中提供理論基礎和實驗依據(jù)。
　　方法：
　　1.在浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院病理科通過術中冰凍切片，HE染色的方法收集前列腺癌癌組織和癌旁組織標本共30例。
　　2.在RNA水平用RT-PCR技術、在蛋白水平用免疫組化技術檢測eEF1A2在30例前列腺癌癌組織與癌旁組織表達及其差異性。

2、>　　3.用特異性siRNA干擾技術在前列腺癌細胞系DU-145和PC-3中抑制eEF1A2的表達，采用CCK8方法檢測細胞的增殖活力，用克隆形成方法檢測細胞的增殖能力。用流式細胞儀法來檢測細胞周期分布和凋亡水平。
　　4.Western Blot方法檢測凋亡相關蛋白的表達變化。
　　結果：
　　1.RT-PCR和免疫組化的結果均顯示eEF1A2在前列腺癌癌組織中的表達明顯高于癌旁組織。
　　2.研究eEF1A2

3、在前列腺的相應的生物學功能。分別在DU-145和PC-3細胞系中均轉染si-eEF1A2和si-NC（實驗組和對照組），CCK8結果顯示，si-eEF1A2實驗組的細胞增殖能力明顯低于si-NC對照組，克隆形成結果顯示，實驗組的克隆數(shù)量和大小均低于對照組。流式細胞儀檢測結果顯示，實驗組細胞的凋亡水平明顯高于對照組細胞。
　　3.Western Blot證明在eEF1A2被抑制之后，凋亡相關蛋白cleavage-caspase3，線

4、粒體內(nèi)凋亡相關蛋白BAD，BAX，PUMA的表達量明顯上調(diào)。
　　4.免疫組化的結果顯示，前列腺癌組織中，eEF1A2和cleavage-caspase3的表達量呈明顯的負相關，而BAD，BAX，PUMA與eEF1A2之間沒有相關性。
　　結論：
　　數(shù)據(jù)表明eEF1A2在前列腺癌中具有癌基因的特性，其功能表現(xiàn)在腫瘤增殖方面，其與eEF1A2抑制癌細胞的凋亡有關。在前列腺癌治療中，eEF1A2可能是一個潛在的治療靶位。