SDF-1激活PI3K-Akt通路在卵巢癌細(xì)胞增殖和侵襲中的作用.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩52頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:
  通過觀察基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(stromal cell-derivedfactor l,SDF-1)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信號傳導(dǎo)通路抑制劑LY294002對卵巢癌細(xì)胞SKOV3和CAOV3增殖和侵襲能力的影響,探討SDF-1對上皮性卵巢癌細(xì)胞的增殖和侵襲產(chǎn)生影響的分子機制中是否有PI3K/Akt信號

2、傳導(dǎo)通路的作用。
  方法:
  1.將卵巢癌細(xì)胞SKOV3和CAOV3分別分為以下4組:(1)空白對照組,(2)實驗組1(含100ng/ml SDF-1的培養(yǎng)液),(3)實驗組2(含50μmol/L LY294002的培養(yǎng)液),(4)實驗組3(預(yù)先用含50μmol/L LY294002的培養(yǎng)液作用卵巢癌細(xì)胞0.5h后再加入含100ng/ml SDF-1的培養(yǎng)液)。
  2.將卵巢癌細(xì)胞SKOV3和CAOV3分別在不同

3、藥物處理條件下培養(yǎng)24h、48h和72h后,應(yīng)用四甲基偶氨唑藍比色(MTT)法檢測兩種卵巢癌細(xì)胞在不同藥物處理條件下培養(yǎng)不同時間的細(xì)胞增殖能力。
  3.將卵巢癌細(xì)胞SKOV3和CAOV3分別在不同藥物處理條件下培養(yǎng)48h后運用體外微孔隔離室板(Transwell)法檢測兩種卵巢癌細(xì)胞的侵襲能力。
  4.運用蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測卵巢癌細(xì)胞SKOV3和CAOV3分別在不同藥物處理條件下培養(yǎng)48h后,

4、Akt的磷酸化程度和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的分泌情況。
  結(jié)果:
  1.不同藥物處理條件下卵巢癌細(xì)胞 SKOV3的 MTT結(jié)果:不同藥物作用24h對卵巢癌細(xì)胞 SKOV3的增殖作用無明顯影響,四組卵巢癌細(xì)胞吸光度值之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。不同藥物作用48h和72h時,SDF-1組(實驗組1)與對照組進行比較,SDF-1可以明顯促進卵巢癌細(xì)胞S

5、KOV3的增殖(P<0.05);50μmol/L的 LY294002組(實驗組2)以及預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細(xì)胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組(實驗組3)分別與對照組進行比較,卵巢癌細(xì)胞SKOV3的增殖能力明顯減弱(P<0.05);而預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細(xì)胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組(實驗組3)與100ng/ml的SDF-1組(實驗組1)進

6、行比較,SDF-1對卵巢癌細(xì)胞SKOV3促進增殖的作用明顯被抑制(P<0.05),同時預(yù)先用50μmol/L的 LY294002處理卵巢癌細(xì)胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組(實驗組3)與50μmol/L的LY294002組(實驗組2)進行比較,兩組卵巢癌細(xì)胞吸光度值之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
  不同藥物處理條件下卵巢癌細(xì)胞 CAOV3的 MTT結(jié)果:不同藥物分別作用于卵巢癌細(xì)胞CAOV324h、4

7、8h和72h時,100ng/ml的SDF-1組與對照組進行比較, SDF-1可以明顯促進卵巢癌細(xì)胞 CAOV3的增殖(P<0.05);50μmol/L的LY294002組以及預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細(xì)胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組分別與對照組進行比較,卵巢癌細(xì)胞CAOV3的增殖能力明顯減弱(P<0.05);而預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細(xì)胞CAOV3后再加入100ng/

8、ml的SDF-1組與100ng/ml的SDF-1組進行比較,SDF-1對卵巢癌細(xì)胞CAOV3的促進增殖的作用明顯被抑制(P<0.05),同時預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理卵巢癌細(xì)胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1組與50μmol/L的LY294002組進行比較,兩組卵巢癌細(xì)胞吸光度值之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
  2.體外細(xì)胞侵襲實驗結(jié)果:100 ng/ml的SDF-1組與對照組進行比較,

9、SDF-1可以明顯促進兩種卵巢癌細(xì)胞的侵襲(P<0.05);50μmol/L的 LY294002組以及預(yù)先用50μmol/L的 LY294002處理兩種卵巢癌細(xì)胞后再加入100ng/ml的SDF-1組分別與對照組進行比較,兩種卵巢癌細(xì)胞的侵襲能力明顯減弱(P<0.05);而預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細(xì)胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與100ng/ml的SDF-1組進行比較,SDF-1對兩種卵巢癌細(xì)胞促

10、進侵襲的作用明顯被抑制(P<0.05),同時預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細(xì)胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與50μmol/L的LY294002組進行比較,兩種卵巢癌細(xì)胞的侵襲能力無明顯差異(P>0.05)。
  3.Western Blot結(jié)果:卵巢癌細(xì)胞SKOV3和CAOV3在不同藥物處理48h后表達Akt、p-Akt和MMP-9蛋白量的變化基本一致,在基礎(chǔ)狀態(tài)下兩種卵巢癌細(xì)胞內(nèi)均有一定程度的P

11、I3K/Akt信號傳導(dǎo)通路的激活以及MMP-9蛋白的分泌,而且兩種卵巢癌細(xì)胞在不同藥物處理條件下表達Akt蛋白的量均無明顯差異(P>0.05)。100ng/ml的SDF-1組與對照組進行比較,SDF-1對PI3K/Akt信號傳導(dǎo)通路中Akt的活化以及MMP-9蛋白的分泌起到促進作用(P<0.05);50μmol/L的LY294002組以及預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細(xì)胞后再加入100ng/ml的SDF-1組分別

12、與對照組進行比較,表達p-Akt和MMP-9蛋白的量均明顯減少(P<0.05);而預(yù)先用50μmol/L的LY294002處理兩種卵巢癌細(xì)胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與100ng/ml的SDF-1組進行比較,SDF-1對Akt活化和MMP-9蛋白分泌的促進作用明顯被抑制(P<0.05),同時預(yù)先用50μmol/L的 LY294002處理兩種卵巢癌細(xì)胞后再加入100ng/ml的SDF-1組與50μmol/L的LY294002組

13、進行比較,Akt的活化程度以及MMP-9蛋白分泌之間的差異均無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
  結(jié)論:
  1.SDF-1對人卵巢癌細(xì)胞系SKOV3和CAOV3的增殖和侵襲起促進作用;
  2.PI3K/Akt信號傳導(dǎo)通路抑制劑LY294002對人卵巢癌細(xì)胞系SKOV3和CAOV3的增殖和侵襲起抑制作用;
  3.阻斷PI3K/Akt信號傳導(dǎo)通路后,SDF-1對人卵巢癌細(xì)胞系SKOV3和CAOV3增殖和侵襲的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論