植酸對多巴胺能神經元保護作用機制的研究.pdf

1、目的：研究植酸（Phytic acid，PA）對1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶（MPTP）誘導的帕金森病人神經母細胞瘤SH-SY5Y細胞模型中細胞活力、胞漿內游離鈣離子濃度變化、多巴胺轉運蛋白DAT含量、β-鏈蛋白（β-catenin）和糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）表達、突觸囊泡循環(huán)的影響。探討植酸通過Wnt/β-cate nin信號通路和突觸囊泡循環(huán)作用對MPTP誘導的帕金森細胞模型多巴胺能神經元的可能的保護作用機

2、制。
　　方法：通過體外培養(yǎng)SH-SY5Y細胞，經PA預處理，MPTP誘導細胞建立帕金森病細胞模型，通過MTT比色法檢測細胞活性以分析PA的神經保護作用，用鈣離子熒光探針Fura-2/AM測定PA對胞漿內游離鈣離子濃度變化的影響，用蛋白質免疫印跡法（Western blot）檢測多巴胺轉運蛋白DAT的表達，通過實時熒光定量PCR和細胞免疫熒光分析β-catenin和GSK-3β的表達，用FM1-43探針通過突觸囊泡循環(huán)作用分析PA

3、預處理對細胞的影響。
　　結果：MTT結果表明，PA預處理能夠劑量依賴性的減弱MPTP誘導的細胞凋亡和細胞損傷；通過Fura-2/AM熒光探針檢測表明PA能夠減少MPTP誘導的胞內游離鈣離子水平的增加；Western blot分析顯示，PA可以使多巴胺轉運蛋白（DAT）表達量顯著上調；實時熒光定量PCR和細胞免疫熒光結果表明，PA能夠激活SH-SY5Y細胞內Wnt/β-cate nin信號通路的標志物的表達水平。此外，通過FM1-