IL-22對HUVECs細胞因子表達、增殖功能及屏障功能的影響.pdf

1、目的：
　　通過檢測IL-22（白細胞介素22）在細胞因子表達、細胞增殖功能以及屏障功能方面對HUVECs（人臍靜脈內皮細胞）的影響，來探討IL-22對血管炎發(fā)生發(fā)展的影響。
　　方法：
　　1.用半定量RT-PCR技術檢測IL-22R1在HUVECs中的表達情況。
　　2.實時定量PCR技術以及Western blot技術分別用于檢測IL-22作用前后IL-6, IL-8, CCL2, ICAM1, VCAM1

2、, CXCR4及 CCL20等細胞因子在HUVECs中mRNA水平以及蛋白質水平的表達變化情況。
　　3.通過CCK8實驗檢測不同濃度的IL-22作用前后HUVECs的增殖能力變化情況與不同濃度的LPS對HUVECs的增殖抑制情況。另外將不同濃度的IL-22作用于HUVECs預處理24h后，再將等濃度的LPS作用于細胞24h，最后用CCK8實驗來檢測IL-22對LPS的增殖抑制是否有對抗作用。
　　4.用FITC標記的右旋糖

3、酐通過HUVE單層細胞的滲透率來檢測不同濃度的IL-22作用前后HUVECs的屏障功能變化情況以及不同濃度的LPS對HUVECs屏障功能的影響。另外將不同濃度的IL-22作用于HUVECs預處理24h后，再將等濃度的LPS作用于細胞24h，最后用FITC標記的右旋糖酐通過HUVE單層細胞的滲透率來檢測IL-22對LPS的屏障破壞是否有對抗作用。
　　結果:
　　1.IL-22R1 mRNA在HUVECs中持續(xù)表達。
　

4、　2.IL-22作用于HUVECs后，趨化因子CCL2和 CCL20的表達在mRNA水平及蛋白質水平均可見明顯增加，而炎癥因子IL-6及IL-8的表達則未見明顯變化。
　　3.IL-22作用于HUVECs后，HUVECs的增殖率得到顯著提高。LPS可以顯著抑制HUVECs的增殖率。被IL-22預處理過的HUVECs其增殖率不受LPS的抑制。
　　4.IL-22作用于HUVECs后，HUVECs的滲透率下降，occludin的

5、表達增強。LPS可以提高HUVECs的滲透率并降低occludin的表達。被IL-22預處理過的HUVECs其滲透率受LPS的影響減少，occludin的表達情況同單獨用IL-22作用后相似。
　　結論:
　　1.IL-22的受體IL-22R1在HUVECS中廣泛表達，表明HUVECs是IL-22作用的靶細胞之一。
　　2.IL-22還可以提高趨化因子CCL2與CCL20的表達，卻對炎癥因子IL-6及IL-8的表達無明