骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)退變椎間盤(pán)細(xì)胞因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討纖維環(huán)穿刺法誘導(dǎo)椎間盤(pán)退變建立動(dòng)物模型的可行性和；BMSCs移植至退變動(dòng)物模型后，觀察移植后退變椎間盤(pán)中細(xì)胞因子表達(dá)的變化及其規(guī)律。
　　方法：（1）取32只新西蘭大白兔行暴露椎間盤(pán)，其中24只大白兔經(jīng)右側(cè)腹膜外入路準(zhǔn)確暴露L3/4、L4/5和L5/6，血管鉗夾持16G穿刺針準(zhǔn)確刺入L3/4、L4/5和L5/6椎間盤(pán)的纖維環(huán)，造成纖維環(huán)破裂，誘導(dǎo)退變。并隨機(jī)分成空白組（B組）、干預(yù)組（C組）和實(shí)驗(yàn)組（D組）；剩下8只暴露

2、椎間盤(pán)，但不穿刺，作為正常組（A組）；于術(shù)后4周，在每組中隨機(jī)抽取2只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行MRI，觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物椎間盤(pán)退變情況；（2）將培養(yǎng)擴(kuò)增的P3代BMSCs移植入已退變椎間盤(pán)的動(dòng)物模型D組中，C組植入等量的藻酸鹽，A、B組不作任何處理；（3）移植后2、4、8、12周，每次每組取2只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物椎間盤(pán)，并利用RT-PCR檢測(cè)椎間盤(pán)中MMP-1、MMP-2、MMP-3、IL-1、TNF-α和TGF-β的表達(dá)量，Weston Blot檢測(cè)椎間盤(pán)中PG、

3、Ⅱ型膠原的含量變化；（4）SPSS12.0分析上述各數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果：（1）通過(guò)MRI、WB可以證明纖維環(huán)穿刺法可以有效誘導(dǎo)動(dòng)物椎間盤(pán)退變；（2）RT-PCR，WB檢測(cè)結(jié)果經(jīng)SPSS12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：退變椎間盤(pán)中MMP-1、MMP-2、MMP-3、IL-1和TNF-α表達(dá)量較正常椎間盤(pán)高（P＜0.05）；BMSCs移植入退變椎間盤(pán)后MMP-1、MMP-2、MMP-3、IL-1和TNF-α的表達(dá)量減少（P＜0.05），并隨移植時(shí)間

4、延長(zhǎng)，表達(dá)量呈遞減趨勢(shì)；退變椎間盤(pán)中TGF-β表達(dá)量較正常椎間盤(pán)低（P＜0.05）；BMSCs的移植入退變椎間盤(pán)后TGF-β的表達(dá)量增加（P＜0.05），并隨移植時(shí)間延長(zhǎng)，表達(dá)量呈遞增趨勢(shì)；PG和Ⅱ型膠原在退變椎間盤(pán)的表達(dá)小于正常椎間盤(pán)，移植入BMSCs后，兩者表達(dá)量增加，并隨時(shí)間的延長(zhǎng)，增加越明顯。
　　結(jié)論：（1）纖維環(huán)穿刺法可以有效誘導(dǎo)兔椎間盤(pán)的緩慢退變，為研究椎間盤(pán)的退行性變提供有效的動(dòng)物模型；（2）退變椎間盤(pán)中MMP-1