急性低氧對大鼠胃組織細胞端粒長度的影響及其機制研究.pdf

1、目的：通過檢測急性低氧環(huán)境下大鼠胃組織細胞端粒長度及 TERT（端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶， Telomerase reverse transcriptase）、HIF-1a（低氧誘導(dǎo)因子1α， Hypoxia-inducible factor1α）、HIF-2a（低氧誘導(dǎo)因子2α，Hypoxia-inducible factor2α）、ROS（活性氧自由基，reactive oxygen species）表達水平，觀察急性低氧環(huán)境下大鼠胃組織細胞

2、端粒長度的變化，并探討其具體機制。
　　方法：①選擇雄性Wistar大鼠40只，隨機分為對照組(n=10，蘭州，1500米)與實驗組(n=30，低壓氧艙，5000米)，實驗組根據(jù)低氧暴露時間不同，分為低氧1d、3d、7d三組，每組各10只，取各組大鼠胃組織，行HE染色并在顯微鏡下觀察胃組織細胞大體形態(tài)結(jié)構(gòu)變化；②提取各組大鼠胃組織細胞DNA，采用Real-time PCR法測其端粒長度；③提取各組大鼠胃組織細胞總RNA及蛋白，采用

3、Real-time PCR及Elisa法分別測其TERT、HIF-1α及HIF-2αmRNA及蛋白表達水平；④制備各組大鼠胃組織勻漿液，采用化學(xué)熒光法測其ROS水平；⑤分析各組大鼠胃組織細胞TERT、HIF-1α、HIF-2α及ROS水平在其端粒長度變化中的作用，并行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：①在低壓氧艙中模擬5000m高海拔（嚴重低氧環(huán)境）構(gòu)建出高原嚴重低氧對大鼠胃組織細胞的損傷模型，其病理結(jié)果顯示隨著低氧時間的逐漸延長，胃黏膜損

4、傷逐漸加重，主要表現(xiàn)為胃黏膜腺體逐漸萎縮，黏膜充血，大量炎細胞浸潤，細胞發(fā)生嗜酸性變；②與對照組相比，各時間點實驗組端粒長度均延長（P＜0.05），并且隨著低氧時間的延長，端粒長度表現(xiàn)為逐漸增加的趨勢；③各組TERT、HIF-1αmRNA及蛋白表達水平的變化趨勢與其端粒長度的變化趨勢基本一致，但其HIF-2αmRNA及蛋白表達水平未見這一變化趨勢，僅在低氧7天組表達增加；④實驗組ROS表達量與對照組相比均增加（P＜0.05），并且隨著低

5、氧時間的延長，ROS表達量逐漸升高；⑤大鼠胃組織細胞中TERT與HIF-1α的蛋白表達水平呈正相關(guān)（r=0.839 P＜0.05），而TERT與HIF-2α蛋白表達水平無相關(guān)性（r=0.298 p=0.062）；⑥大鼠胃組織細胞中TERT與HIF-1αmRNA表達水平呈正相關(guān)（r=0.904 P＜0.05）；TERT mRNA表達水平與端粒長度呈正相關(guān)（r=0.962 P＜0.05），而 TERT與 HIF-2α mRNA表達無相關(guān)性（

6、r=0.298 p=0.248）。
　　結(jié)論：①急性嚴重高原低氧環(huán)境可使機體ROS表達增加，進而導(dǎo)致大鼠胃組織細胞損傷；②急性嚴重高原低氧環(huán)境可誘導(dǎo)大鼠胃組織細胞端粒延長，并且端粒的長度隨著低氧時間的延長而延長，且與TERT與HIF-1α表達呈正相關(guān)，而與 HIF-2α表達無明顯相關(guān)，由此考慮急性高原嚴重低氧引起端粒延長的機制為：大鼠胃組織細胞HIF-1α表達水平升高，誘導(dǎo)TERT表達及端粒酶活性增加，來延長端粒；③急性嚴重高原低