斑馬魚神經(jīng)膠質瘤模型的建立及其相關分子機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景:神經(jīng)膠質瘤是一種發(fā)源于神經(jīng)外胚層的常見顱內腫瘤,臨床上以浸潤性生長和廣泛侵襲性為主要特點并伴有轉移現(xiàn)象的發(fā)生,已成為危害人類生命健康的主要腫瘤之一。盡管診斷和治療水平的提高使得神經(jīng)膠質瘤的局控率有明顯改善,但是目前臨床上仍無法找到克服膠質瘤廣泛侵襲和轉移的好辦法。在基礎實驗中,以往主要是在體外去研究膠質瘤發(fā)病的分子機理,相關的體內分子機制研究主要是使用傳統(tǒng)的嚙齒動物——大小鼠模型。此類模型周期長,效率低,也很難動態(tài)監(jiān)測腫瘤的體

2、內發(fā)展情況。這些缺點極大的制約了膠質瘤體內分子作用機制的研究。因此,建立新的膠質瘤模型,全面地解析神經(jīng)膠質瘤浸潤性生長和轉移的分子機制,深入探索神經(jīng)膠質瘤轉移的相關標志物,是有效控制神經(jīng)膠質瘤進一步惡化,提高患者生存率的關鍵。斑馬魚作為脊椎動物模式生物具備了自己很多獨特的優(yōu)點:它易于飼養(yǎng),經(jīng)濟方便,產(chǎn)卵量高,斑馬魚體外受精,胚胎透明,易于實驗觀察,其基因組與人來有著高度的同源性,分子遺傳學操作簡便易行。在自然界中,斑馬魚也會自發(fā)產(chǎn)生各利

3、組織器官的癌變,并且與人類的腫瘤在器官和組織水平上都有著很大的相似性,其致癌基因也與人類的癌癥相關基因有著很大的保守性。斑馬魚腫瘤模型在抗腫瘤藥物篩選及其分子靶標研究中更是具備了高效性和動態(tài)觀察的優(yōu)勢,并逐漸成為國際上腫瘤體內研究中的熱門工具。
   目的:我們借助斑馬魚胚胎建立膠質瘤模型可以解決神經(jīng)膠質瘤體內分子作用機制研究中周期長和效率低的難點,并可以高效的進行抗腫瘤藥物的篩選。利用此種模式生物,我們可以研究神經(jīng)膠質瘤體內治

4、療中新的分子作用靶標及其信號通路中靶標分子的作用機制,為神經(jīng)膠質瘤的治療尋找新的突破。
   方法:首先使用細胞生物學方法建立熒光標記的膠質瘤細胞系,接著使用顯微注射法將膠質瘤細胞移植入斑馬魚體內,最后使用原位雜交、熒光定量RT-PCR、血管內源性堿性磷酸酶染色及熒光顯微鏡直接觀察轉基因魚等方法檢測膠質瘤細胞和斑馬魚的相關變化情況。
   結果:我們成功的建立了斑馬魚神經(jīng)膠質瘤模型,并發(fā)現(xiàn)人膠質瘤細胞可以在斑馬魚胚胎體內

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