利用茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開關(guān)定量研究lncRNA TINCR在膀胱癌的表達及功能.pdf

1、背景及目的：
　　膀胱癌是常見且復(fù)雜的惡性腫瘤，盡管近年膀胱癌預(yù)測及研究模型已經(jīng)取得巨大進展，但為了進一步提高檢測工具的特異性及可信性，更多全新的生物標記急需被補充。研究顯示lncRNAs與多種癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其中l(wèi)ncRNA TINCR是引導(dǎo)上皮細胞分化過程中重要的調(diào)節(jié)性非編碼RNA，同時其被發(fā)現(xiàn)與消化道腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)，能夠影響相關(guān)癌癥惡性表型。因此本實驗研究將探討TINCR在膀胱癌組織及細胞的表達水平，分析其在膀胱癌

2、細胞中的潛在功能。為了全面且準確地研究TINCR相關(guān)功能，我們利用合成生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建了茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開關(guān)系統(tǒng)，定量調(diào)控TINCR基因水平后驗證起其在膀胱癌細胞的作用機制。從而進一步認識膀胱癌的分子網(wǎng)絡(luò)，為膀胱癌精準醫(yī)療提供新的研究基礎(chǔ)。
　　方法：
　　利用實時熒光定量PCR檢測TINCR在49對膀胱癌組織樣本及2個膀胱癌細胞系中的相對表達量，分析其與臨床病理特征的關(guān)聯(lián)。利用siRNA干擾技術(shù)下調(diào)膀胱癌細胞的TINCR

3、表達水平后，分別檢測細胞增殖和凋亡功能的改變。進一步通過茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開關(guān)系統(tǒng)調(diào)控膀胱癌細胞的TINCR表達水平，分別檢測開關(guān)系統(tǒng)對細胞增殖和凋亡功能的改變。
　　結(jié)果：
　　膀胱癌組織中的TINCR表達水平高于癌旁組織（P=0.023），且其與腫瘤原發(fā)灶有關(guān)（P=0.035），同時膀胱癌細胞5637（P=0.026）及SW780（P<0.01）的TINCR表達水平高于永生化膀胱上皮細胞SV-HUC-1。si-TINC

4、R能夠有效下調(diào)TINCR表達水平，且能夠抑制膀胱癌細胞的增殖并促進膀胱癌細胞的凋亡。茶堿誘導(dǎo)性 RNA干擾開關(guān)系統(tǒng)能夠定量下調(diào)TINCR表達水平，并且利用開或關(guān)元件可“打開”或者“關(guān)閉”TINCR的下調(diào)引起的膀胱癌惡性表型改變。
　　結(jié)論：
　　LncRNA TINCR在膀胱癌中可能發(fā)揮著促癌基因的作用，利用茶堿誘導(dǎo)性RNA干擾開關(guān)系統(tǒng)能夠定量調(diào)控TINCR的表達水平，精確地驗證其在膀胱癌的功能，充分說明TINCR或許能夠作