1.小鼠骨髓間充質干細胞向子宮內膜腺上皮分化的蛋白質組學研究;2.tp53單核苷酸多態(tài)性rs1042522與絨癌的相關性研究

1、復旦大學博士學位論文1.小鼠骨髓間充質干細胞向子宮內膜腺上皮分化的蛋白質組學研究2.TP53單核苷酸多態(tài)性rs1042522與絨癌的相關性研究姓名：叢青申請學位級別：博士專業(yè)：婦產科學指導教師：徐叢劍2012-03-21復旦大學博士學位論文一小鼠骨髓間充質千細胞向子宮內膜腺上皮分化的蛋白質組學研究 中文摘要們設想子宮內膜腺上皮來源于骨髓來源干細胞中的間充質干細胞，若體外能夠將骨髓間充質干細胞誘導為子宮內膜腺上皮，將具有極大的臨床治療意義

2、。在此基礎上，課題組開展了體外誘導骨髓間充質干細胞( B M S C s ) 向子宮內膜腺上皮方向分化的研究，體外將B M S C s 與子宮內膜間質細胞( E S t C s ) 間接共培養(yǎng)，r e a l t i m eR T - P C R 檢測上皮方面標記物角蛋白7 、1 8 、1 9 、上皮膜抗原顯著增加，免疫熒光進一步驗證共培養(yǎng)后角蛋白顯著增加，表明骨髓間充質干細胞在體外共培養(yǎng)體系下可以向子宮內膜腺上皮方向分化。為進一步研究

3、B M S C s 向子宮內膜腺上皮方向分化過程發(fā)生的一系列重要蛋白質分子及信號轉導通路變化，故對誘導前后的B M S C s 、子宮內膜腺上皮行同位素標記相對和絕對定量( i s o b a r i c t a g sf o r r e l a t i v ea n d a b s o l u t eq u a n t i t a t i o n ，i T R A Q ) 蛋白質組學分析，以獲得這一分化過程的重要蛋白分子及信號通路變化

4、信息。本課題具體分為以下三部分。第一部分，為獲取足量的未分化、分化B M S C s 、子宮內膜腺上皮以行蛋白質組學分析、比較，我們原代培養(yǎng)并鑒定小鼠B M S C s 和E S t C s ，建立了兩種細胞的共培養(yǎng)體系促使B M S C s 向子宮內膜腺上皮分化，并采用激光捕獲顯微切割技術獲取足量小鼠子宮內膜腺上皮，提取五組樣品的蛋白，調整五組蛋白量后上機行i T R A Q 蛋白質組學檢測，并通過數據庫查找信息，明確2 0 8 種蛋

5、白名稱及其相對定量，為探尋B M S C s 向子宮內膜腺上皮方向分化的差異蛋白分子及相關信號通路分析提供堅實的基礎。第二部分，選取蛋白質組學鑒定結果中上皮細胞和間質細胞標記進行w e s t e r nb l o t 檢測，在對蛋白質組學鑒定結果進行驗證的同時，進一步說明B M S C s向子宮內膜腺上皮方向分化。驗證結果表明大部分組學結果可靠，并通過進一步驗證隨共培養(yǎng)時間增加上皮細胞標志物表達增加、間質細胞標記物表達下降，進一步闡明

6、了骨髓間充質干細胞在共培養(yǎng)體系下隨時間進展不斷向子宮內膜方向分化。第三部分，為研究B M S C s 向子宮內膜腺上皮方向分化過程發(fā)生的一系列蛋白質分子及信號轉導通路變化，選取第七天共培養(yǎng)誘導分化組與單獨培養(yǎng)組比值> 1 ．2 或< O ．8 3 3 的蛋白作為差異蛋白進行分析。差異蛋白的系統聚類分析從整體差異蛋白水平進一步闡明了共培養(yǎng)體系誘導后的分化；差異蛋白的分子功能、生物學過程、信號通路的分析顯示，能量代謝是重要基礎，