生物大分子與有機小分子相互作用的熒光法研究.pdf

1、熒光光譜法作為一種重要的現代儀器分析方法，它具有靈敏度高、選擇性強、用量少、方法簡便、信息多樣等優(yōu)點，因而被廣泛應用于化學、生物學、藥學、醫(yī)學、環(huán)境科學等領域。本文提出以巴比妥、酞紫、甲基百里酚藍和達旦黃為熒光探針，研究結果表明： 1.采用熒光光譜法分別研究了巴比妥、酞紫與牛血清白蛋白相互作用的特點，實驗發(fā)現巴比妥、酞紫對牛血清白蛋白均有較強的熒光猝滅作用。利用熒光猝滅理論，分別研究了巴比妥、酞紫對牛血清白蛋白的猝滅機理，測定了

2、兩個反應體系的結合常數、結合位點數及熱力學參數△G、△H和△S，根據熱力學參數和離子強度實驗確定了兩者的作用力類型。采用同步熒光技術分別考察了巴比妥、酞紫對牛血清白蛋白構象的影響。 2.采用熒光光譜法和紫外—可見吸收光譜法分別研究了甲基百里酚藍、達旦黃與牛血清白蛋白結合反應的特征。實驗發(fā)現：甲基百里酚藍、達旦黃對牛血清白蛋白均有較強的熒光猝滅作用，根據熒光猝滅數據，由Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk雙

3、倒數方程得到了反應的結合常數和熱力學參數，并由此推出了結合反應的主要作用力類型。在此基礎上依據Forester非輻射能量轉移理論，分別探討了甲基百里酚藍、達旦黃與牛血清白蛋白相互結合時，給體—受體間的距離和能量轉移效率。從而證實了反應為靜態(tài)猝滅過程，且闡明了其猝滅機制是通過能量轉移產生的。 3.對達旦黃與DNA的結合反應進行熒光光譜法、紫外光譜法等方面的研究，結果表明：在pH=7.4的溶液中達旦黃與DNA的雙螺旋堿基對之間存在嵌