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文檔簡介
1、動物肝臟中動物肝臟中DNADNA的提取及檢測的提取及檢測一、前言一、前言脫氧核糖核酸脫氧核糖核酸脫氧核糖核酸(DNA,為英文Deoxyribonucleicacid的縮寫),又稱去氧核糖核酸,是脫氧核糖核酸染色體的主要化學成分,同時也是組成基因的材料。有時也被稱為“遺傳微?!?,原因是在繁殖過程中,父代會把它們自己DNA的一部分復制傳遞到子代中,從而完成性狀的傳播。DNA是高分子聚合物,DNA溶液為高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基綠染
2、成綠色。DNA對紫外線(260nm)有吸收作用,利用這一特性,可以對DNA進行含量測定。當核酸變性時,吸光度升高,稱為增色效應;當變性核酸重新復性時,吸光度又會恢復到原來的水平。較高溫度、有機溶劑、酸堿試劑、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子變性,即DNA雙鏈堿基間的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開—也稱為DNA的解螺旋。在細胞內,DNA能與蛋白質結合形成染色體,整組染色體則統(tǒng)稱為染色體組。對于人類而言,正常的體細中含有46條染色體。染色體在細胞
3、分裂之前會先在分裂間期完成復制,細胞分裂間期又可劃分為:G1期DNA合成前期、S期DNA合成期、G2DNA合成后期。對于真核生物,如動物、植物及真菌而言,染色體主要存在于細胞核內;而對于原核生物,如細菌而言,則主要存在于細胞質中的擬加夫(E.gaff)發(fā)現(xiàn)不同物種DNA的堿基組成不同,但其中的腺嘌呤數等于其胸腺嘧啶數(A=T),鳥嘌呤數等于胞嘧啶數(G=C),因而嘌呤數之和等于嘧啶數之和,一般用幾個層次描繪DNA的結構。濃鹽法從動物組織
4、中提取濃鹽法從動物組織中提取DNADNA核酸和蛋白質在生物體中常以核蛋白(DNPRNP)的形式存在,其中DNP能溶于水及高濃度鹽溶液,但在0.14M的鹽溶液中溶解度很低,而RNP則可溶于低鹽溶液,因此可利用不同濃度的NaCl溶液將其從樣品中分別抽提出來。將抽提得到的DNP用SDS處理可將其分離DNA和蛋白質,用氯仿異戊醇將蛋白質沉淀除去可得DNA上清,加入冷乙醇即可將其呈纖維狀析出。肝臟細胞肝臟細胞肝臟是由肝細胞組成,肝細胞極小,肉眼看
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