淺談校準(zhǔn)曲線(xiàn)

1、淺談校準(zhǔn)曲線(xiàn)淺談校準(zhǔn)曲線(xiàn)校準(zhǔn)曲線(xiàn)是描述待測(cè)物質(zhì)濃度或量與檢測(cè)儀器響應(yīng)值或指示量的校準(zhǔn)曲線(xiàn)是描述待測(cè)物質(zhì)濃度或量與檢測(cè)儀器響應(yīng)值或指示量的定量關(guān)系的曲線(xiàn)。根據(jù)朗伯定量關(guān)系的曲線(xiàn)。根據(jù)朗伯——比耳定律，一束單色光通過(guò)一定厚比耳定律，一束單色光通過(guò)一定厚度吸光池的稀溶液時(shí)，吸光度與吸光物質(zhì)（被測(cè)定的物質(zhì)）的濃度度吸光池的稀溶液時(shí)，吸光度與吸光物質(zhì)（被測(cè)定的物質(zhì)）的濃度成正比。若以吸光度為縱軸，被測(cè)物質(zhì)的含量為橫軸作圖，應(yīng)得到成正比。若以吸光度

2、為縱軸，被測(cè)物質(zhì)的含量為橫軸作圖，應(yīng)得到一通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的直線(xiàn)，這條直線(xiàn)既校準(zhǔn)曲線(xiàn)（工作曲線(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn)曲一通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的直線(xiàn)，這條直線(xiàn)既校準(zhǔn)曲線(xiàn)（工作曲線(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)）。理論上講，自變量被測(cè)物質(zhì)的含量與因變量吸光度是呈一次線(xiàn)）。理論上講，自變量被測(cè)物質(zhì)的含量與因變量吸光度是呈一次線(xiàn)性函數(shù)關(guān)系，實(shí)際上，兩變量?jī)H有直線(xiàn)趨勢(shì)，而且當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的線(xiàn)性函數(shù)關(guān)系，實(shí)際上，兩變量?jī)H有直線(xiàn)趨勢(shì)，而且當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度過(guò)大時(shí)，直線(xiàn)的上端將無(wú)直線(xiàn)趨勢(shì)。現(xiàn)就工作中，校準(zhǔn)

3、曲線(xiàn)的濃度過(guò)大時(shí)，直線(xiàn)的上端將無(wú)直線(xiàn)趨勢(shì)。現(xiàn)就工作中，校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制，相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)及截距檢驗(yàn)、斜率檢驗(yàn)，談點(diǎn)膚淺認(rèn)識(shí)。繪制，相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)及截距檢驗(yàn)、斜率檢驗(yàn)，談點(diǎn)膚淺認(rèn)識(shí)。一、校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制一、校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制在實(shí)際工作中，不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，用分光光度計(jì)測(cè)定在實(shí)際工作中，不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，用分光光度計(jì)測(cè)定對(duì)應(yīng)的吸光度是個(gè)隨機(jī)變量，以吸光度為縱軸，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為對(duì)應(yīng)的吸光度是個(gè)隨機(jī)變量，以吸光度為縱軸，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫軸，點(diǎn)繪兩

4、變量關(guān)系圖時(shí)呈直線(xiàn)趨勢(shì)。若所用試劑和蒸餾水等橫軸，點(diǎn)繪兩變量關(guān)系圖時(shí)呈直線(xiàn)趨勢(shì)。若所用試劑和蒸餾水等含有與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同的物質(zhì)，則標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中的零管所對(duì)應(yīng)的含有與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同的物質(zhì)，則標(biāo)準(zhǔn)溶液系列中的零管所對(duì)應(yīng)的吸光度將不等于零。故繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)時(shí)，必須考慮基體的影響。吸光度將不等于零。故繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)時(shí)，必須考慮基體的影響。通常做法是：首先將標(biāo)準(zhǔn)溶液系列所對(duì)應(yīng)的吸光度進(jìn)行試劑空白通常做法是：首先將標(biāo)準(zhǔn)溶液系列所對(duì)應(yīng)的吸光度進(jìn)行試劑空白校正

5、（系統(tǒng)誤差校正），然后根據(jù)最小二乘法原理進(jìn)行回歸分析，校正（系統(tǒng)誤差校正），然后根據(jù)最小二乘法原理進(jìn)行回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。在實(shí)際工作中經(jīng)常遇到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不成直線(xiàn)的情況，特別是當(dāng)在實(shí)際工作中經(jīng)常遇到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不成直線(xiàn)的情況，特別是當(dāng)吸光物質(zhì)的濃度較高時(shí)，明顯的表現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)向下或向上偏離。吸光物質(zhì)的濃度較高時(shí)，明顯的表現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)向下或向上偏離。?求得的兩個(gè)回歸方程如下求得的兩個(gè)回歸方程如下?表1：y=0.060x0.0136?

6、表2：y=0.060x0.000從以上兩方程可知：兩方程斜率相等，截距不等，表從以上兩方程可知：兩方程斜率相等，截距不等，表1求得求得的截距的截距0.0136表示試劑空白的大小，它是圍繞它的總體均值零表示試劑空白的大小，它是圍繞它的總體均值零呈正態(tài)分布的隨機(jī)變量，是實(shí)驗(yàn)室誤差在呈正態(tài)分布的隨機(jī)變量，是實(shí)驗(yàn)室誤差在y軸上的反映。實(shí)驗(yàn)誤軸上的反映。實(shí)驗(yàn)誤差越小，截距越趨進(jìn)于零，若實(shí)驗(yàn)中存在正的或負(fù)的系統(tǒng)誤差，差越小，截距越趨進(jìn)于零，若實(shí)驗(yàn)中

7、存在正的或負(fù)的系統(tǒng)誤差，則截距也將總是正值或負(fù)值，遇此情況就應(yīng)查明原因消除系統(tǒng)誤則截距也將總是正值或負(fù)值，遇此情況就應(yīng)查明原因消除系統(tǒng)誤差。同時(shí)截距值也是校正曲線(xiàn)是否通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的尺度。差。同時(shí)截距值也是校正曲線(xiàn)是否通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的尺度。3、回歸校準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率檢驗(yàn)、回歸校準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率檢驗(yàn)回歸校準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率檢驗(yàn)即檢驗(yàn)分析方法的靈敏度，方法靈回歸校準(zhǔn)曲線(xiàn)的斜率檢驗(yàn)即檢驗(yàn)分析方法的靈敏度，方法靈敏度是隨實(shí)驗(yàn)條件的變化而變化的。在完全相同的分析條

8、件下，敏度是隨實(shí)驗(yàn)條件的變化而變化的。在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機(jī)誤差導(dǎo)致的斜率變化不應(yīng)超出一定的允許范僅由于操作中的隨機(jī)誤差導(dǎo)致的斜率變化不應(yīng)超出一定的允許范圍，此范圍因分析方法的精度不同而異。圍，此范圍因分析方法的精度不同而異。校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)是描述待測(cè)物質(zhì)濃度或量與檢測(cè)儀器響應(yīng)值或指示量校準(zhǔn)曲線(xiàn)是描述待測(cè)物質(zhì)濃度或量與檢測(cè)儀器響應(yīng)值或指示量的定量關(guān)系的曲線(xiàn)。的定量關(guān)系的曲線(xiàn)。根據(jù)朗伯根據(jù)朗伯——比

9、耳定律，一束單色光通過(guò)一定厚度吸光池的稀比耳定律，一束單色光通過(guò)一定厚度吸光池的稀溶液時(shí)，吸光度與吸光物質(zhì)（被測(cè)定的物質(zhì)）的濃度成正比。若溶液時(shí)，吸光度與吸光物質(zhì)（被測(cè)定的物質(zhì)）的濃度成正比。若以吸光度為縱軸，被測(cè)物質(zhì)的含量為橫軸作圖，應(yīng)得到一通過(guò)坐以吸光度為縱軸，被測(cè)物質(zhì)的含量為橫軸作圖，應(yīng)得到一通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的直線(xiàn)，這條直線(xiàn)既校準(zhǔn)曲線(xiàn)（工作曲線(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)）。標(biāo)原點(diǎn)的直線(xiàn)，這條直線(xiàn)既校準(zhǔn)曲線(xiàn)（工作曲線(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)）。理論上講，自變量被測(cè)物