11 薄層色譜法檢驗操作規(guī)程

1、GMP質(zhì)量管理（9）文件編號：ZLSOPTZ01101第1頁共4頁薄層色譜法檢驗操作規(guī)程薄層色譜法檢驗操作規(guī)程文件名：薄層色譜法檢驗操作規(guī)程文件編號：ZLSOPTZ01101制定人：日期：年月日文件類型：工作標準審核人：日期：年月日版次：第二版批準人：日期：年月日印數(shù)：共2份生效日期：年月日頒發(fā)部門：GMP辦公室分發(fā)至：質(zhì)量保證部、化驗室1.目的：規(guī)范薄層色譜法檢驗操作，保證檢驗的質(zhì)量。2.適用范圍：適于本公司原料、成品檢驗。3.責(zé)任者

2、：質(zhì)量保證部、中心化驗室、化驗員對本規(guī)程實施負責(zé)。4.檢驗依據(jù)：《中國獸藥典》2010年版一部附錄。5.內(nèi)容：5.1薄層色譜法，系將供試品溶液點樣于薄層板上，經(jīng)展開、檢視后所得的色譜圖，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用于藥品的鑒別或雜質(zhì)檢查。5.2儀器與材料5.2.1薄層板：除另有規(guī)定外，玻板要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。最常用的固定相有硅膠G、硅膠GF254、硅膠H和硅膠HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧

3、化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F254等。其顆粒大小，一般要求粒徑為5～40m。薄層涂布，一般分為無黏合劑和含黏合劑兩種。前者系將固定相直接涂布于玻板上，后者系在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用10%～15%煅石膏（CaSO4.2H2O在140℃加熱4小時）混勻后加水適量使用，或羧甲基纖維素鈉水GMP質(zhì)量管理（9）文件編號：ZLSOPTZ01101第3頁共4頁出為宜，一般為1.0～2.0cm。。點樣時必須注意勿損傷薄層板表面。5.3

4、.3展開：展開缸如需先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑并在壁上貼兩條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封頂蓋，使系統(tǒng)平衡或按各品種項下的規(guī)定操作。將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.0cm（切勿將樣點浸入展開劑中），待展開至規(guī)定距離（一般為10～15cm），取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測。展開可以單向展開，即向一個方向展開，也可以進行雙向展開，即先向一個方向展開，

5、取出，待展開劑完全揮發(fā)后，將薄層板轉(zhuǎn)動900，再用原展開劑或另一種展開劑進行展開；亦可多次展開。5.3.4顯色與檢視熒光薄層板可用熒光猝滅法；普通薄層板，有色物質(zhì)可直接檢視；無色物質(zhì)可用物理或化學(xué)方法檢視。物理方法是檢出斑點的熒光顏色及強度；化學(xué)方法一般用化學(xué)試劑顯色后，立即覆蓋同樣大小的玻板，檢視。5.4系統(tǒng)適用性試驗按各品種項下要求對檢測方法進行系統(tǒng)適用性試驗，使斑點的靈敏度比移值（Rf）、和分離效能符合規(guī)定。（1）檢測靈敏度系指雜

6、質(zhì)檢查時，采用對照溶液稀釋若干倍的溶液與供試品溶液和對照溶液在規(guī)定的色譜條件下，在同一塊薄層板上點樣、展開、檢視，前者應(yīng)顯示清晰的斑點。（2）比移值（Rf）系指從基線至展開斑點中心的距離與從基線至展開劑前沿的距離的比值。從基線至展開斑點中心的距離Rf=從基線至展開劑前沿的距離可用供試品溶液主斑點與對照品溶液主斑點的比移值進行比較，或用比移值來說明主斑點或雜質(zhì)斑點的位置。（3）分離效能鑒別時，在對照品與結(jié)構(gòu)相似的藥物的對照品制成的混合對照