常見限制性酶切位點_第1頁
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1、常見限制性內(nèi)切酶識別序列(酶切位點)(BamHI、EcI、HindIII、NdeI、XhoI等)分子生物學實驗室技術(shù)2009111717:46:32閱讀2235評論2字號:大中小訂閱.在分子克隆實驗中,限制性內(nèi)切酶是必不可少的工具酶。無論是構(gòu)建克隆載體還是表達載體,要根據(jù)載體選擇合適的內(nèi)切酶(當然,使用T載就不必考慮了)。先將引物設(shè)計好,然后添加酶切識別序列到引物5’端(英語怎么說?)。常用的內(nèi)切酶比如BamHI、EcI、HindIII

2、、NdeI、XhoI等可能你都已經(jīng)記住了它們的識別序列,不過為了保險起見,還是得查證一下。下面,我就總結(jié)了一些常用的內(nèi)切酶的識別序列,僅供各位參考。下面這些內(nèi)切酶都屬于II型內(nèi)切酶。先介紹一下什么是II型內(nèi)切酶吧。TheTypeIIrestrictionsystemstypicallycontainindividualrestrictionenzymesmodificationenzymesencodedbyseparategenes.

3、TheTypeIIrestrictionenzymestypicallyrecognizespecificDNAsequencescleaveatconstantpositionsatclosetothatsequencetoproduce5phosphates3hydroxyls.UsuallytheyrequireMg2ionsasacofactalthoughsomehavemeexoticrequirements.Themeth

4、yltransferasesusuallyrecognizethesamesequencealthoughsomearemepromiscuous.ThreetypesofDNAmethyltransferaseshavebeenfoundaspartofTypeIIRMsystemsfmingeitherC5methylcytosineN4methylcytosineN6methyladenine.ApaI(類型:TypeIIrest

5、rictionenzyme)識別序列:5GGGCC^C3BamHI(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5G^GATCC3BglII(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5A^GATCT3EcI(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5G^AATTC3HindIII(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5A^AGCTT3KpnI

6、(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5GGTAC^C3NcoI(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5C^CATGG3NdeI(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5CA^TATG3NheI(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5G^CTAGC3NotI(類型:TypeIIrestrictionenzyme)識別序列:5GC

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