免疫缺陷病及其免疫檢驗

1、第二十一章 免疫缺陷性疾病及其免疫檢驗,第一節(jié) 免疫缺陷病的分類和特點 一、免疫缺陷病分類 二、免疫缺陷病的特點,第二節(jié) 原發(fā)性免疫缺陷病 一、原發(fā)性B細胞缺陷 二、原發(fā)性T細胞缺陷 三、重癥聯(lián)合免疫缺陷 四、原發(fā)性吞噬細胞缺陷 五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺陷,第四節(jié) 免疫缺陷病檢驗 一、B細胞缺陷的檢測 二、T細胞缺陷的檢測 三、吞噬細胞缺陷的檢測 四、補體系統(tǒng)缺陷的檢測

2、 五、獲得性免疫缺陷病的檢測,第三節(jié) 繼發(fā)性免疫缺陷病 一、繼發(fā)性免疫缺陷的常見原因 二、獲得性免疫缺陷綜合征,思考題小 結,由遺傳因素或其他原因造成的免疫系統(tǒng)發(fā)育或免疫應答障礙而導致的一種或多種免疫功能不全稱為免疫缺陷(immunodeficiency),由此所致的各種臨床綜合征稱為免疫缺陷病(immunodeficiency disease, ID)。,第一節(jié) 免疫缺陷病的分類和特點,原發(fā)性免疫缺陷性疾?。╬r

3、imary immunodeficiency disease, PIDD）繼發(fā)性免疫缺陷?。╯econdary immunodeficiency disease, SIDD or AIDD）,一、免疫缺陷病分類,反復感染 易發(fā)腫瘤高度伴發(fā)自身免疫病的傾向，以類風濕 關節(jié)炎和惡性貧血等多見。遺傳傾向臨床表現(xiàn)和病理損傷復雜多樣,二、免疫缺陷病的特點,,免疫缺陷病感染特點,,第二節(jié) 原發(fā)性免疫缺陷病,原發(fā)性免疫缺陷性疾?。?/p>

4、primary immunodeficiency disease, PIDD）又稱先天性免疫缺陷病（congenital immunodeficiency disease, CIDD）,是由于免疫系統(tǒng)遺傳基因異?；蛳忍煨悦庖呦到y(tǒng)發(fā)育障礙而致免疫功能不全引起的疾病。,一、原發(fā)性B細胞缺陷病 二、原發(fā)性T細胞缺陷病 三、原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病 四、原發(fā)性吞噬細胞缺陷病 五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺陷病,原發(fā)性免疫缺陷性疾病,由于B細胞

5、先天性發(fā)育不全，或由于B細胞不能接受T細胞傳遞的信號，而導致抗體產(chǎn)生減少的一類疾病。,一、原發(fā)性B細胞缺陷primary B lymphocytes deficiency,實驗室指標特征,主要臨床表現(xiàn),體內Ig水平降低或缺陷外周血B細胞可減少或缺陷T細胞數(shù)量正常。,反復化膿性感染,發(fā)病機制:B細胞的信號轉導分子酪氨酸激酶（Bruton’s tyrosine kinase，Btk）基因缺陷，使得B細胞發(fā)育過程中信號轉導障礙，導致B細

6、胞發(fā)育停滯于前B細胞階段，成熟B細胞數(shù)量減少或缺失。,（一）X性連鎖無丙種球蛋白血癥（X-linked agamaglobulinemia，XLA）,為X連鎖隱性遺傳，多見于男性嬰幼兒。故又稱Bruton病。,臨床表現(xiàn)：患兒多在出生6月后反復發(fā)生化膿性細菌感染,血清中各類Ig含量明顯降低，外周血成熟B細胞和漿細胞數(shù)量幾乎為零。,臨床表現(xiàn)：患兒易反復感染，尤其是呼吸道感染，比低水平免疫球蛋白缺陷病表現(xiàn)更為嚴重。,（二）X性聯(lián)高IgM綜合

7、征（X-linked high IgM syndrome，XLHM）,發(fā)病機制：X-染色體上CD40L基因突變，使T細胞表達CD40L缺陷，其與B細胞CD40的相互作用受阻，導致B細胞活化增殖和Ig類別轉換障礙，不能產(chǎn)生除IgM以外的其它類型免疫球蛋白。,實驗室指標：血清IgM升高而IgG、IgA、IgE水平低下，外周血和淋巴組織中有大量分泌IgM的漿細胞。,實驗室指標：血清IgA水平異常低下（<50mg/L），sIgA缺乏，其

8、它各類Ig水平正常。,（三）選擇性IgA缺陷（selective IgA deficiency）,最常見的選擇性Ig缺陷，為常染色體顯性或隱性遺傳,發(fā)病機制：具有IgA受體的B細胞發(fā)育停滯，不能分化成為分泌IgA的漿細胞。,臨床表現(xiàn)：患者多無明顯癥狀，或僅表現(xiàn)為呼吸道、消化道和泌尿道反復感染，少數(shù)患者可出現(xiàn)嚴重感染，常伴有自身免疫病和超敏反應性疾病。,T細胞的發(fā)生、分化和功能障礙的遺傳性缺陷，其中包括T細胞及其前體。T細胞缺陷不僅影響

9、T效應細胞（如TCL），也會間接影響單核-吞噬細胞和B細胞。因此，多數(shù)T細胞功能缺陷者常伴體液免疫功能缺陷。,二、原發(fā)性T細胞缺陷（primary T lymphocytes deficiency）,患兒T細胞功能缺陷、外周血T細胞數(shù)減少或正常，B細胞和抗體功能正常或偏低。,（一）先天性胸腺發(fā)育不全綜合癥,又稱DiGeorge綜合征，為典型的T細胞缺陷性疾病，并伴甲狀腺功能低下。,發(fā)病機制：由于妊娠早期胚胎第三、四咽囊分化發(fā)育障礙，導

10、致起源于該部位的器官如胸腺、甲狀旁腺、主動脈弓、唇和耳等發(fā)育不全。,臨床特征：有心臟和大血管畸形，反復感染和新生兒24小時內出現(xiàn)手足抽搐,例如：CD3復合分子（?-、?-、?-、?-鏈）基因變異引起TCR-CD3復合物表達或功能受損 ZAP-70（一種酪氨酸激酶）基因變異，不能產(chǎn)生ZAP-70蛋白,（二）TCR活化和功能缺陷,T細胞膜分子表達異?；蛉笔Э蓪е耇細胞活化和功能缺陷,一組胸腺、淋巴組織發(fā)育不全及Ig缺乏的遺傳性疾病，機體

11、不能產(chǎn)生細胞免疫和體液免疫應答?；颊叱錾?個月即出現(xiàn)發(fā)育障礙，易發(fā)嚴重感染而死亡。,三、重癥聯(lián)合免疫缺陷（severe combined immunodeficiency disease，SCID）,患者病理表現(xiàn)：T細胞缺乏或顯著減少B細胞數(shù)量正常但功能異常，導致Ig生成 減少和類型轉換障礙,主要發(fā)病機制：IL-2受體?鏈基因突變。,（一）性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺陷（X-linked SCID,X-SCID）,發(fā)病機制：

12、定位于第20對染色體的ADA基因突變導致ADA缺乏，使腺苷和脫氧腺苷分解障礙，造成核苷酸代謝產(chǎn)物dATP和dGTP在細胞內大量蓄積，對早期T、B細胞有毒性作用，影響RNA、DNA、蛋白質和磷脂合成，使之發(fā)育成熟受阻，造成T細胞和B細胞缺陷。,（二）腺苷脫氨酶缺乏癥（adenosine deaminase,ADA）,主要表現(xiàn)： 吞噬細胞的數(shù)量、移動和（或）黏附功能、殺菌活性等異常,四、原發(fā)性吞噬細胞缺陷primary phagoc

13、ytes deficiency,臨床表現(xiàn)： 化膿性細菌或真菌反復感染,臨床表現(xiàn)：患兒多在出生后1個月內即開始發(fā)生各種細菌的反復感染。,（一）中性粒細胞數(shù)量減少,分類：粒細胞減少癥（granulocytopenia）和粒細胞缺乏癥（agranulocytosis。,發(fā)病機制：G-CSF（粒細胞集落刺激因子）基因突變導致粒細胞分化受阻。,LAD-1發(fā)病機制：是由于CD-18基因突變，使中性粒細胞、巨噬細胞、T細胞、NK細胞表面整合素家

14、族成員表達缺陷，導致中性粒細胞不能與內皮細胞黏附、移行并穿過血管壁到達感染部位。,（二）白細胞黏附缺陷（leukocyte adhesion deficiency，LAD）,分類：分為LAD-1和LAD-2兩種,LAD-2發(fā)病機制：是一種巖藻糖轉移酶基因突變，使得白細胞和內皮細胞表面缺乏能與選擇素家族成員結合的寡糖配體Sialyl-Lewisx（Slex），導致白細胞與內皮細胞間的黏附障礙。,臨床表現(xiàn)：均表現(xiàn)為反復的化膿性細菌感染,發(fā)

15、病機制： 編碼還原型輔酶Ⅱ（NADPH）氧化酶系統(tǒng)的基因缺陷。,（三）慢性肉芽腫?。╟hronic granulomatous disease，CGD）,臨床表現(xiàn)： 為反復的化膿性感染，淋巴結、皮膚、肝、肺、骨髓等器官有慢性化膿性肉芽腫或伴有瘺管形成。,多數(shù)為常染色體隱性遺傳，少數(shù)為常染色體顯性遺傳,屬最少見的原發(fā)性免疫缺陷病。,五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺陷（primary complement system deficien

16、cy）,在補體系統(tǒng)中，幾乎所有的補體固有成分、補體調控蛋白及補體受體都可發(fā)生缺陷。,臨床表現(xiàn)為反復化膿性細菌感染。,發(fā)病機制：C1抑制分子（C1 inhibitor,C1INH）基因缺陷所致。,（一）遺傳性血管神經(jīng)性水腫,為常見的補體缺陷，屬于常染色體顯性遺傳病,臨床表現(xiàn)：反復發(fā)作的皮膚黏膜水腫，若水腫發(fā)生于喉頭可導致窒息死亡。,發(fā)病機制：編碼糖基磷脂酰肌醇（glycosyl phosphatidylinositol,GPI）的pig-

17、α基因翻譯后修飾缺陷，導致GPI合成障礙。,（二）陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿,臨床表現(xiàn)：慢性溶血性貧血、全血細胞減少和靜脈血栓形成，晨尿中出現(xiàn)血紅蛋白。,第三節(jié) 繼發(fā)性免疫缺陷病,繼發(fā)性免疫缺陷病（secondary immunodeficiency disease, SIDD）是后天因素造成的，繼發(fā)于某些疾病或使用藥物后所致的免疫系統(tǒng)暫時或持久損害的一類免疫缺陷性疾病。,分為繼發(fā)性T細胞功能缺陷、繼發(fā)性低丙種球蛋白血癥、繼發(fā)性吞噬細胞功能缺

18、陷和補體缺陷。,1．腫瘤：惡性腫瘤，加之放療、化療、營養(yǎng)不良、消耗 等因素可導致免疫缺陷。2．感染性疾?。阂訦IV感染所致的艾滋病最為嚴重。3．遺傳性疾?。喝旧w異常、酶缺乏、血紅蛋白病等。4．營養(yǎng)不良 5．免疫抑制療法6．其它：如電離輻射、手術、創(chuàng)傷、脾切除等均可引起 免疫功能低下。,一、繼發(fā)性免疫缺陷的常見原因,又稱艾滋病，是由人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）

19、感染引起的一組綜合征。病人以CD4+T細胞減少為主要特征，同時伴反復機會感染、惡性腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變。,二、獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）,艾滋病全球分布情況,AIDS的病因：人類免疫缺陷病毒 （human immunodifiency virus，HIV） HIV-1和HIV-2兩型。,（一）病原學,,HIV

20、的型和亞型,HIV的主要結構基因和相應的抗原,（二）HIV的致病機制,HIV通過gp120與靶細胞表面的CD4分子高親和性結合，同時也與表達在靶細胞表面的趨化因子受體（CXCR4和CXCR5）結合，再由gp41介導病毒包膜與細胞膜融合，使病毒得以進入細胞。,1．HIV侵入CD4+靶細胞的機制,CD4分子是HIV糖蛋白的特異性受體，故HIV主要侵犯CD4﹢T細胞。表達CD4分子的單核-吞噬細胞、樹突狀細胞、B細胞、神經(jīng)膠質細胞等也是其重要

21、的靶細胞,2．HIV損傷感染的CD4+細胞：HIV在靶細胞中復制，可通過直接或間接途徑損傷CD4+細胞,3．HIV逃避免疫攻擊的機制 ：HIV感染機體后，可通過不同機制逃避免疫系統(tǒng)識別和攻擊，以利于病毒在體內長期存活并不斷復制。,（三）HIV誘導的免疫應答,HIV感染機體后，HIV會進行性破壞機體免疫系統(tǒng)(尤其是細胞免疫)，但在病程不同階段，機體免疫系統(tǒng)可通過不同應答機制以阻止病毒復制。,體液免疫應答 中和抗體抗P24殼蛋白抗體抗

22、gpl20和抗gp41抗體,細胞免疫應答 CD8+T細胞應答CD4+T細胞應答,1．CD4﹢T細胞數(shù)量顯著減少。2．Th1細胞與Th2細胞平衡失調。3．抗原呈遞細胞功能降低。4．B細胞功能異常，表現(xiàn)為多克隆激活、　　高Ig血癥和產(chǎn)生多種自身抗體。,（四）HIV感染的免疫學特征,HIV感染宿主其特征為潛伏期長、病程發(fā)展緩慢。,（五）HIV感染的臨床特點,HIV急性感染多表現(xiàn)為單核細胞增多樣綜合征，血清可檢出抗HIV抗體。臨床癥

23、狀多發(fā)生于感染后2-6周，表現(xiàn)為發(fā)熱、肌肉痛、關節(jié)痛、頭痛、腹瀉、咽痛和淋巴結腫大等。,HIV在胞內主要呈潛伏感染，當宿主細胞被細菌、病毒、絲裂原激活后，病毒即進行復制。,③神經(jīng)系統(tǒng)損害：約60%的AIDS病人出現(xiàn)AIDS癡呆癥。,（五） AIDS的典型臨床表現(xiàn),①機會性感染：是AIDS病人死亡的主要原因。常見的引起機會感染的病原體是卡氏肺囊蟲和白色念珠菌，其他有巨細胞病毒、帶狀皰疹病毒、隱球菌和鼠弓型蟲等；,②惡性腫瘤：AIDS患者易

24、伴發(fā)Kaposi肉瘤和惡性淋巴瘤，也是AIDS病人常見的死亡原因；,,常見綜合征,愛滋?。úㄊ先饬觯?第四節(jié) 免疫缺陷病檢驗,免疫缺陷病的檢測是多方面、綜合性的，主要涉及體液免疫、細胞免疫、補體和吞噬細胞等方面的檢測，除了采用免疫學方法、分子生物學方法外，一些常規(guī)的和特殊的檢測手段也極為重要。,一、B細胞缺陷病的實驗室檢測 二、T細胞缺陷病的實驗室檢測 三、吞噬細胞缺陷病的實驗室檢測 四、補體系統(tǒng)缺陷病的實驗室檢測

25、五、獲得性免疫缺陷病的實驗室檢測,免疫缺陷病的實驗室檢測,血清Ig測定同種血型凝集素的測定特異性抗體產(chǎn)生能力測定噬菌體試驗B細胞表面膜免疫球蛋白（SmIg）的檢測CD抗原檢測,一、B細胞缺陷的檢測,二、T細胞缺陷的檢測,白細胞計數(shù)趨化功能檢測吞噬和殺傷試驗NBT還原試驗黏附分子檢測,三、吞噬細胞免疫缺陷的檢測,四、補體系統(tǒng)缺陷的檢測,總補體活性單個組分的測定,一般認為CH50、C1q、C4、C3和B因子等幾項檢測可大

26、致反應補體缺陷的情況，對遺傳性血管神經(jīng)性水腫患者必須檢測C1抑制劑才能最終確診。,五、獲得性免疫缺陷病的檢測,HIV感染的免疫學診斷方法主要包括病毒抗原抗病毒抗體免疫細胞數(shù)目和功能,抗體檢測：血液（清）、尿液、唾液抗原檢測：血清（漿）核酸檢測：血清（漿）病毒分離：血液，腦脊液，性分泌液CD4細胞檢測：血液病毒載量測定：血清（漿）,檢測標本種類,（一）HIV抗原檢測,常用ELISA法檢測HIV的核心抗原P24。,P24出現(xiàn)

27、于急性感染期和AIDS晚期，其定量檢測可作為早期或晚期病毒量的間接指標。,在潛伏期，P24檢測常為陰性。,（二）HIV抗體檢測,HIV感染后2～3月可出現(xiàn)抗體，并可持續(xù)終身，此為艾滋病的常規(guī)檢測指標。,初篩試驗：ELISA法 　膠乳凝集法 　免疫金層析法 確認試驗：免疫印跡法,初篩查最基本，最可靠的手段ELISA試劑敏感性和特異性越來越高與抗原檢測同時進行,ELISA法檢測HIV抗體,,常用的方法有免疫

28、斑點法、免疫層析法、硒標記法、金標記法和凝集試驗等。,HIV抗體快速檢測,OraQuick test,,（1）便于操作，大部分快速檢測試劑均為一步法，只需在樣品孔中按要求滴上樣品后在規(guī)定的時間內觀察結果即可。,（2）反應時間短，一般為15～60分鐘，大部分試劑的反應時間為30分鐘。,（3）可以目測，不需要特殊的儀器設備。,HIV快速檢測法的優(yōu)點,,（5）試劑可在室溫條件下保存， 如雅培HIV-1/2抗體診斷試劑在30℃ 儲存12個月后的

29、試劑敏感性與儲存與 2~8℃的試劑敏感性相同。,（4）技術要求不高。方法簡單，受訓的技術員都可操作。,確認試劑必須經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準。,HIV抗體確認試驗,確認試驗可使用免疫印跡法、條帶免疫法及免疫熒光法。目前以免疫印跡法（WB試驗）最為常用。,HIV抗體確認試驗判斷標準,,①HIV抗體陽性：至少有兩條膜帶（gp41/ gp120/ gp160）或至少一條膜帶與p24帶同時出現(xiàn)；,②HIV抗體陰性：無HIV抗體特異性條帶出

30、現(xiàn)；,③HIV抗體可疑：出現(xiàn)HIV特異性條帶，但帶型不足以確認陽性者。,（三）CD4+T細胞計數(shù),CD4+T細胞計數(shù)是反映HIV感染患者免疫系統(tǒng)損害狀態(tài)的最明確指標。,美國疾病控制中心將CD4+T細胞計數(shù)作為艾滋病臨床分期和判斷預后的重要依據(jù)。,當CD4+T細胞低于500/μl，則易機會性感染；低于200/μl，則發(fā)生AIDS。,感染后4-11天病毒RNA檢測方法：NASBA,　RT-PCR,　b-DNA,（四）病毒RNA檢測,在高度懷

31、疑有原發(fā)感染時，且經(jīng)抗體檢測之后抗體檢測陰性或不確定，有高危行為史或暴露史，特別是伴有相應的臨床表現(xiàn)時，用核酸檢測進行輔助診斷。,核酸檢測有假陽性，特別是檢測值較低時診斷應特別謹慎，一般在急性感染時血漿病毒載量在102～105，最高可達106，但病毒載量>50000則感染的可能性極高。,目前，美國FDA還沒有批準將核酸檢測作為診斷指標，只用于治療觀察和評價。,1．什么是免疫缺陷?。?．免疫缺陷病分幾類？3．免疫缺陷病的特征有哪

32、些？4．什么是原發(fā)性B細胞缺陷病？其基本特征和代表性疾病有哪些？5．什么是原發(fā)性T細胞缺陷??？其基本特征和代表性疾病有哪些？6．什么是重癥聯(lián)合免疫缺陷?。科浠咎卣骱痛硇约膊∮心男?？7．什么是原發(fā)性吞噬細胞缺陷?。科浠咎卣骱痛硇约膊∮心男?？8．什么是繼發(fā)性免疫缺陷病？最常見誘因有哪些？9．什么是獲得性免疫缺陷綜合征？其免疫學特點及臨床特征有哪些？10．各種免疫缺陷病的主要免疫學檢測方法有哪些？,思考題,免疫缺陷病是免

33、疫系統(tǒng)先天發(fā)育不全或后天損傷所致的疾病，分為原發(fā)性免疫缺陷性疾病和繼發(fā)性免疫缺陷病兩大類。免疫缺陷病主要臨床表現(xiàn)有反復感染；高發(fā)惡性腫瘤和自身免疫病；有一定遺傳傾向。 AIDS是最常見的繼發(fā)性免疫缺陷病。HIV主要侵犯CD4+T細胞以及表達CD4分子的巨噬細胞等 ，通過直接或間接途徑損傷受感染的CD4+細胞。 gp120 、gp41 在其致病中發(fā)揮重要作用。免疫缺陷病檢驗主要涉及體液免疫、細胞免疫、補體和吞噬細胞等方面的數(shù)量和功能