紅提葡萄白腐病拮抗微生物的選育及生物防治的應用.pdf

1、目前，白腐病已成為我國紅提葡萄生產中最嚴重的病害之一，在我國各紅提葡萄主要產區(qū)均有發(fā)生，且其發(fā)病率逐年上升，直接影響紅提葡萄的質量和產量，危害巨大。
　　 本研究對廣譜拮抗菌株PT2進行了菌株分類鑒定、拮抗菌株對病原菌的抑制作用、菌株的復合誘變選育、混合菌種發(fā)酵研究、工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化、田間防治等紅提葡萄白腐病生物防治關鍵技術進行了系統(tǒng)地研究，以期為紅提葡萄白腐病的生物防治提供理論依據和奠定應用基礎，旨在探索一條綠色、高效、可持

2、續(xù)的紅提葡萄白腐病病害防治途徑。
　　 通過形態(tài)學觀察、生理生化試驗以及16SrRNA序列分析等手段，對廣譜拮抗菌株PT2進行分類鑒定，確認其為一株枯草芽孢桿菌。做PT2對白腐病菌的平板拮抗試驗來初步確定其拮抗范圍。采用紫外線、He-Ne激光及二者復合誘變的方法，分別處理枯草芽孢桿菌PT2,以提高其抑菌效果。結果表明，紫外線和He-Ne激光單獨作用，所篩菌株UV10與HN14抑菌效果提高率分別為15.0％與21.7％。而經過對復

3、合誘變條件確定，在紫外線照射90s后，再用15mw的He-Ne激光輻照10min，篩選出最佳正變菌株PT21，抑菌效果提高30.9％，明顯高于單因素誘變，經25代傳代試驗證明其拮抗能力可以進行穩(wěn)定遺傳。
　　 將PT21與另一株具有廣譜拮抗性的枯草芽孢桿菌QM34進行混合培養(yǎng)，包括平板交叉劃線、液體搖瓶培養(yǎng)等方法，觀察混合培養(yǎng)條件下生長量A660及拮抗能力的變化。結果表明，PT21與QM34能共存于同一生長環(huán)境，且二者在生長與拮

4、抗能力兩方面均出現互補提高的效應。通過改進玉米粉液體培養(yǎng)基成分配比，來摸索適合PT21與QM34混合培養(yǎng)的工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基。綜合考慮生長量A660和抑菌圈φ兩個指標，設計了L18(3)6正交表，通過極差分析和方差分析結果，得到了最優(yōu)發(fā)酵條件組合A2B2C2D2E1F2。
　　 根據專利《果渣發(fā)酵生產生化黃腐酸復合微生物菌肥技術》的研究，確定了多級發(fā)酵工藝，以蘋果渣作為原料，多級發(fā)酵生產優(yōu)質生化黃腐酸復合微生物菌肥。將黃腐酸菌肥與拮