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文檔簡介
1、本論文以紹興鴨為研究對象,重點研究了日糧中添加不同種類脂肪酸(fattyacids)對其生產(chǎn)性能、血清指標、肉質pH及脂肪酸組成,蛋黃脂肪酸組成的影響;探討了日糧中不同種類脂肪酸對脂質代謝相關基因表達水平上的影響;根據(jù)鴨原代肝實質細胞分離培養(yǎng)方法,研究了日糧多不飽和脂肪酸單體對體外肝細胞增殖及細胞周期的影響,并直接研究亞油酸(LA)、二十碳五烯酸(EPA)單體對肝細胞脂類代謝基因的影響,為研究紹興鴨脂肪代謝和調控機理提供依據(jù)。
2、 1.日糧不同種類脂肪酸對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清指標的影響
為了研究日糧不同種類的脂肪酸對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清指標的影響,本試驗將264只17周齡健康、體重相近的蛋鴨隨機分成4組,每組66只(含3個重復,每個重復22只)進行飼養(yǎng)試驗。對照組飼喂基礎日糧,試驗組分為魚油組(含3%魚油),葵花籽油組(含2.5%葵花籽油),高脂組(含3%棕櫚油+2%牛油)。結果表明:除了魚油組能夠提高產(chǎn)蛋率,其他各組都不能顯著改變紹興鴨的生產(chǎn)
3、性能;與對照組相比,魚油組顯著降低血清TG和TC含量(P<0.05),SOD活性在各實驗組都有不同程度的升高,高脂組MDA含量顯著高于其他各組(P<0.05),肝組織切片觀察發(fā)現(xiàn),高脂組飼料導致紹興鴨肝細胞內的脂肪富集。
2.日糧不同種類脂肪酸對紹興鴨肌肉脂肪酸組成和蛋品質的影響
為了研究日糧不同種類的脂肪酸對紹興鴨肉質pH、肌肉脂肪沉積及脂肪酸組成的影響。本試驗將264只17周齡健康、體重相近的蛋鴨隨機分成
4、4組,每組66只(含3個重復,每個重復22只)進行飼養(yǎng)試驗。對照組飼喂基礎日糧,試驗組分為魚油組(含3%魚油),葵花籽油組(含2.5%葵花籽油),高脂組(含3%棕櫚油+2%牛油)。結果表明:pH值在48h以內逐漸降低,pH值從6.55降低到5.5。隨著飼料中脂肪含量的增加,肌肉中的脂肪沉積量也增加,兩者存在正相關,肌肉和蛋黃中的n-3PUFA總量在魚油組最高,而n-6PUFA總量在葵花籽油含量最高,脂肪酸含量的變化充分反映了日糧的脂肪酸
5、組成。魚油組顯著降低了肌肉和蛋黃中n-6/n-3 PUFA的比值(P<0.01),在肌肉中n-3 PUFA主要以沉積EPA為主,而在蛋黃中主要以沉積DHA為主。
3.日糧不同種類脂肪酸對脂類代謝相關基因表達的影響
本試驗利用Q-PCR技術研究不同種類脂肪酸對紹興鴨脂類代謝相關基因表達的影響。結果表明:與對照組相比,添加脂肪酸后ACC、FAS、SR-1、SCD等脂肪合成相關基因的mRNA表達水平大都顯著降低(p
6、<0.05),除了高脂組SCD基因的表達量沒有顯著變化;脂肪氧化基因PPAR-α和ACOX的mRNA表達水平則顯著升高(p<0.05);脂類轉運相關基因L-FABP mRNA表達水平增加(p<0.05),ApoB mRNA表達水平L-FABP基因變化趨勢則相反,再添加脂肪酸后mRNA表達水平降低。
4.亞油酸(LA)、二十碳五烯酸(EPA)對紹興鴨肝實質細胞增殖的影響及脂質相關基因表達影響
大量研究發(fā)現(xiàn)LA和
7、EPA影響哺乳動物細胞增殖和脂類代謝基因的表達,但是在水禽中少有報道,本實驗在鴨肝實質細胞培養(yǎng)基內加入LA和EPA單體,結果發(fā)現(xiàn):LA和EPA單體在0-100μM的范圍內可以促進肝細胞的增殖并且存在一定的劑量依賴性關系,流式細胞儀檢測細胞周期發(fā)現(xiàn),100μM LA和EPA促進了G0/G1到S期的轉化,在LA組S期的細胞含量從7.8%增加到11.4%,而在EPA組S期的細胞含量從7.8%增加到10.5%。PPAR-α、ACOX、LPL、L
8、-FABP等脂類氧化相關基因的表達量也發(fā)生了變化,其中PPAR-α、ACOX、LPL基因在添加LA和EPA后顯著增加(P<0.05),但是L-FABP基因的表達量卻未發(fā)生變化。對于脂類合成相關基因SR-1、FAS、SCD基因的表達量顯著升高(P<0.05),ACC基因表達量在加入LA和EPA并未受到顯著影響。
5.紫蘇籽提取物對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清生化指標及脂類代謝相關基因的影響
紫蘇籽種子油中含有大量的不飽
9、和脂肪酸本實驗選擇產(chǎn)蛋高峰期230只青殼Ⅱ號,隨機分為2個處理,每組5個重復,每個重復23只。試驗全期42d??瞻捉M喂給基礎日糧(不添加任何藥物),試驗組在基礎日糧中添加200mg/kg紫蘇籽提取物。每天記錄產(chǎn)蛋率,蛋重,料蛋比,于42日后每組剖殺3只試驗鴨,靜脈采血,分離血清,測定血清生化指標。結果表明:添加200mg/kg紫蘇籽提取物可顯著降低血清TC含量,提高血清HDL含量和產(chǎn)蛋率(P<0.05),另外添加200mg/kg紫蘇籽提
10、取物在一定程度上可降低血清中TG含量(P>0.05)。添加200mg/kg紫蘇籽提取物后脂類合成相關基因SREBP-1、ACC、SCD、FAS、ApoB的表達量顯著降低,而脂類氧化相關基因PPARa和ACOX基因mRNA的表達量顯著升高(P<0.05),同樣L-FABP基因的表達量也升高。
綜上所述,飼養(yǎng)試驗研究表明,日糧不同種類的脂肪酸對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清指標的產(chǎn)生不同程度的影響。肌肉和蛋黃中的脂肪酸含量的變化充分反映
11、了日糧的脂肪酸組成,其中n-3PUFA總量在魚油組最高,而n-6PUFA總量在葵花籽油含量最高。添加脂肪酸后ACC、FAS等脂肪合成相關基因的mRNA表達水平顯著降低;脂肪氧化基因PPAR-α和ACOX的mRNA表達水平升高。LA和EPA單體在0-100μM的范圍內可以促進鴨肝實質肝細胞的增殖并且存在一定的劑量依賴性關系,并且促進了脂類氧化合成相關基因的表達。添加200mg/kg紫蘇籽提取物可顯著降低紹興鴨血清TC含量,提高血清HDL含
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