外來入侵生物B型煙粉虱對噻蟲嗪的代謝抗性分子機(jī)制研究.pdf

1、B型煙粉虱是一種分布范圍廣、經(jīng)濟(jì)危害性較大的農(nóng)業(yè)害蟲。而噻蟲嗪是目前防治煙粉虱效果較好的殺蟲劑，作為第二代新煙堿類殺蟲劑的典型代表，也是第一個硫代煙堿類殺蟲劑，因其高效、低毒、安全的特點(diǎn)成為目前防治刺吸類害蟲的首選藥劑。為了明確煙粉虱對噻蟲嗪的抗性機(jī)制，本研究利用RT-PCR技術(shù)克隆了B型煙粉虱抗性、敏感品系的P450基因CYP6CM1，并進(jìn)行序列比對分析；利用熒光定量PCR技術(shù)對其抗性、敏感品系CYP6CM1基因的mRNA表達(dá)量進(jìn)行了

2、定量分析與比較；對RNA干擾(RNA interference，RNAi)技術(shù)進(jìn)行了初步研究，本研究的結(jié)果如下： (1)成功克隆出B型煙粉虱的P450基因cyp6cm1，其中敏感品系、抗性品系長均為1592bp，含有1563bp的完整的開放閱讀框，編碼521個氨基酸；抗性品系與敏感品系相比，CYP6CM1基因發(fā)生了3個堿基替換，導(dǎo)致2個氨基酸替換，堿基替換的位置分別位于編碼區(qū)的1048，1357，1377位。氨基酸替換為E350

3、 G、P452T?？剐浴⒚舾衅废档腸yp6cm1基因的核苷酸相似性為99.81％，氨基酸序列一致性為99.62％。 (2)采用熒光定量PCR技術(shù)研究了CYP6CM1基因在抗性、敏感品系中的mRNA表達(dá)差異，結(jié)果表明CYP6CM1基因在抗性品系中的mRNA表達(dá)量比敏感品系高，分別為86.81、23.72，抗性品系的表達(dá)量為敏感品系的3.66倍，初步表明噻蟲嗪抗性的形成可能與該基因的過量表達(dá)有一定的關(guān)系。 (3)對RNA干擾