豬水腫病與仔豬副傷寒二價基因工程疫苗研究.pdf

1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬水腫病與仔豬副傷寒二價基因工程疫苗研究姓名：滿曉營申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：吳斌200906012009屆華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文長曲線得出C501(pVASF)生長速度與親本菌株C500相似，而比C500缺失菌株AasdC500(pYA3493)的生長速度稍快。遺傳特性研究表明重組菌株可以穩(wěn)定遺傳。SDSPAGE結(jié)果顯示，重組菌株可以分泌表達，因為重組菌株C501(pYASLTIIeBFed

2、F)在約37kDa處有明顯的表達帶，而空載體對照菌株C501(pYA3493)貝J]沒有對應(yīng)的表達帶。4、基因工程疫苗對小鼠的免疫保護效力研究皮下免疫小鼠，每周采集小鼠血清，利用間接ELISA檢測所有免疫組的IgG抗體，結(jié)果表明針對相應(yīng)抗原的抗體相應(yīng)增加，加強免疫后抗體平均水平進一步提高。小鼠免疫后30天，分別用豬霍亂沙門氏菌強毒株C781(1107。1CFU)口服攻毒和豬水腫病大腸桿菌強毒株WH3(5x108CFU)腹腔攻毒，親本菌株

3、C500組和重組菌株免疫組小鼠抵抗10xLD50的豬霍亂沙門氏菌強毒株C781的攻擊，而PBS對照組小鼠全部死亡，然而重組菌株免疫組和水腫病三價滅活苗組對25xLD50大腸桿菌強毒株WH3的攻擊差別比較大，重組菌株免疫組只能提供43％的保護率，滅活苗組卻能提供89％的保護率，同期的PBS對照組小鼠全部死亡。5、基因工程疫苗對豬的免疫保護力研究重組菌株的安全性試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有C500(pYASF)肌肉注射接種組仔豬的精神食欲正常，未見異常

4、變化。親本菌株C500接種的仔豬，也沒有異常臨床表現(xiàn)。將6109CFU重組菌株C501(pYASF)分別通過肌肉注射途徑免疫20日齡仔豬，結(jié)果顯示免疫仔豬能產(chǎn)生較高水平的抗沙門氏菌和SLTEC重組蛋白rSF的血清IgG，并能抵抗5xLD50豬霍亂沙門氏菌強毒株C781的耳靜脈攻擊(4／4)。同時，免疫仔豬也能抵抗SLTEC強毒株WH3分泌毒素的耳靜脈攻毒途徑的攻擊(3／4)，而PBS組(0／4)和C501(pYA3493)載體對照組(1