蘇云金芽孢桿菌的分離和鑒定研究.pdf

1、農(nóng)業(yè)蟲(chóng)害在全球范圍內(nèi)對(duì)農(nóng)作物造成的損害，是農(nóng)作物減產(chǎn)的最主要因素之一。由于蘇云金芽孢桿菌對(duì)大多數(shù)農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)都具有特異的殺蟲(chóng)活性，并且，對(duì)人畜安全，不污染環(huán)境。目前，已成為世界上產(chǎn)量最多、應(yīng)用最廣泛的微生物殺蟲(chóng)劑。Bt的主要?dú)⑾x(chóng)活性與其攜帶的編碼ICPs(ICPs)的cry基因密切相關(guān)，因此，cry基因工程研究便成為近幾年研究的熱點(diǎn)。到目前為止，國(guó)際上已經(jīng)克隆了476種殺蟲(chóng)蛋白基因，但是隨著B(niǎo)t應(yīng)用的不斷擴(kuò)大，Bt ICPs基因均在不同程度

2、上引發(fā)了昆蟲(chóng)的抗性，尋找新的菌株和基因是解決昆蟲(chóng)抗性問(wèn)題的有效途徑之一。 本研究從全國(guó)19個(gè)省份采集了276份土樣，利用溫度篩選法并結(jié)合復(fù)紅染色鑒定蘇云金桿菌，共分離獲得蘇云金芽孢桿菌144株。對(duì)所分離的菌株進(jìn)行了生理生化鑒定，有91株菌已經(jīng)確定其亞種。再利用10對(duì)引物對(duì)所分離菌株進(jìn)行cry/cyt基因的鑒定，有66株菌含有cry/cyt基因。在此基礎(chǔ)上利用聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法，將17個(gè)cry7/cry8基因分為四類(lèi)，將13