β-防御素-5 mRNA在荷斯坦奶牛乳腺上皮細胞中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、奶牛乳腺炎是一種復(fù)雜的綜合性乳腺疾病。它病因復(fù)雜，可由多種病原微生物侵入乳腺而引起，所以防治不易。目前，關(guān)于β-防御素的抗乳房炎作用的研究很少。
　　本研究首先采用膠原酶消化法和胰蛋白酶選擇消化法，對荷斯坦奶牛乳腺上皮細胞進行了分離、培養(yǎng)和純化，并利用形態(tài)學(xué)、核型分析和熒光定量RT-PCR檢測α-酪蛋白等方法對所培養(yǎng)乳腺上皮細胞進行了鑒定。隨后，通過添加代表大腸桿菌為主要侵染力的脂多糖（LPS）建立了實驗性乳房炎的乳腺上皮細胞模型

2、，并采用實時熒光定量RT-PCR方法檢測乳腺上皮細胞中細胞因子IL-6、IL-12、TNF-α及α-酪蛋白和β-防御素（BNBD5）mRNA的表達水平。研究結(jié)果顯示，添加LPS后乳腺上皮細胞中炎性因子IL-6、IL-12和TNF-α的mRNA表達量與空白對照組相比顯著增加（p<0.01），并且α-酪蛋白mRNA表達量顯著降低（p<0.01），說明添加LPS誘發(fā)上皮細胞產(chǎn)生了一定的炎性。并且添加LPS刺激乳腺上皮細胞后，乳腺上皮細胞中BN

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