瓜類細菌性果斑病菌hrp基因簇部分基因的克隆及功能研究.pdf

1、由燕麥噬酸菌西瓜亞種（Acidovorax avenae subsp.citrulli，Aac）引起的瓜類細菌性果斑病是葫蘆科植物上的一種嚴重的細菌性病害。它主要危害西瓜、甜瓜等的果實和葉片，產(chǎn)生病斑并造果實腐爛，導致減產(chǎn)，近年來發(fā)病趨勢持續(xù)上升，對我國經(jīng)濟造成嚴重損失。因此，需要我們盡快地找到有效的防治措施，而對瓜類細菌性果斑病菌致病機理的研究則對該病害的防治具有重要的指導意義。
　　 植物病原菌對其寄主的致病過程是由多種成分

2、參與的復雜的生物化學和生理代謝過程，而由hrp（Hypersensitive Response&Pathogenicity）基因編碼的Ⅲ型分泌系統(tǒng)（typeⅢsecretion system，T3SS）能將效應因子或無毒基因產(chǎn)物轉運至植物細胞內(nèi)，在細菌對寄主的致病過程和非寄主的過敏性反應中起重要作用。目前，對瓜類細菌性果斑病菌的研究主要集中于病原菌鑒定、病原菌檢測方法和技術、傳播機理、防治措施等方面，對其致病機理的研究少有報道，至今未有

3、其hrp相關基因的報道。
　　 hrp基因存在于革蘭氏陰性植物病原細菌中，決定病原細菌對寄主植物致病性和誘導非寄主及抗病植物過敏性反應（hypersensitive response，HR）。本研究從果斑菌的hrp基因簇中克隆了hpaA、hrcT、hrcC和hrpG基因，通過同源重組的方法，分別構建了它們的突變體。電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，hpaA和hrpG基因突變體的鞭毛缺失且細胞形態(tài)發(fā)生顯著變化，而hrcT和hrcC，基因突變體的鞭毛和

4、細胞形態(tài)未發(fā)生明顯變化。在煙草和哈密瓜葉片上的測定結果顯示hpaA、hrcT和hrcC的突變體均失去在煙草上的HR激發(fā)能力和在哈密瓜葉片上的致病性；hrpG在煙草上的HR激發(fā)能力和在哈密瓜上的致病性則顯著減弱；進一步的生長曲線測定結果表明，hpaA、hrcT、hrcC、hrpG的突變體的定殖能力均顯著下降。相應地，功能互補后突變體基本恢復至野生表型。證明瓜類細菌性果斑病菌hrp基因作為Ⅲ型分泌系統(tǒng)關鍵組份影響病原細菌對寄主植物的致病性和