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文檔簡介
1、碩士學位論文學校代碼:學號:10023S2009475新型疫苗鋅佐劑的制法優(yōu)化及ATP與鋁、鋅復合佐劑免疫增強效果研究Preparationofnewvaccinesadjuvantzinchydroxideandtheimmune—enhancingeffectoftheATPaluminum,theATPzinccompoundadjuvant所院:醫(yī)學生物學研究所姓名:張浩指導教師:胡凝珠主任技師導師小組:胡云章研究員學科專業(yè):生
2、物化學與分子生物學研究方向:新型疫苗與疫苗佐劑完成日期:二O一二年三月中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文摘要疫苗佐劑的發(fā)展直接影響到新型疫苗的開發(fā)及應用,為了開發(fā)出更安全、高效、經濟以及更具有靶向性的佐劑,國內外研究人員進行了大量的研究。目前,鋁佐劑仍然是唯一在世界范圍內被批準用于人用疫苗的佐劑,它主要依賴儲存庫效應和免疫刺激效應的作用機制,能夠顯著提高疫苗在體內的效果,經過了幾十年的應用,雖然出現(xiàn)部分輕微過敏反應,但總體來說其安
3、全性和有效性均得到了證實。鋅是人體必需微量元素之一,人體生長發(fā)育離不開鋅,體內鋅水平的高低會對神經、生殖和免疫系統(tǒng)產生影響。利用鋅與機體免疫系統(tǒng)之間的復雜關系,鋅療法被越來越廣泛地應用于一些疾病的治療中。氫氧化鋅與氫氧化鋁理化性質相近,在一定條件下,二者均能以穩(wěn)定的膠體溶液形式存在,由于鋁佐劑在臨床應用中取得了良好的效果,因此將氫氧化鋅作為疫苗佐劑進行的研究也非常具有潛力,在前期研究中,也初步證實了氫氧化鋅佐劑的安全性和有效性。在本研究
4、中,參照鋁佐劑的制備方法,首先將可溶性鋅鹽葡萄糖酸鋅作為研究對象,利用其與低濃度氫氧化鈉溶液發(fā)生反應,制備出性質穩(wěn)定質地均勻的氫氧化鋅膠體溶液,之后再針對疫苗佐劑的要求對其理化性質進行改進,最終制得可以作為疫苗佐劑使用的氫氧化鋅膠體溶液。三磷酸腺苷二鈉(ATP)是一種輔酶,有改善機體代謝的作用,同時又是體內能量的主要來源。ATP能在某些免疫反應中扮演重要角色,實驗表明,ATP在與MgCl2復合使用后,可以對體內IgG、IgA、IgM表達
5、水平產生一定的影響,同時,ATP是體內一類重要的內源性危險信號因子,在缺氧、組織損傷、病變發(fā)生時,多會伴隨周圍組織體液中ATP水平的變化,利用這一特點,改變體內ATP的水平在一定條件下也能有效激活免疫系統(tǒng),并影響其效應過程。因此,ATP也作為一類潛在疫苗佐劑得到進一步的開發(fā)和研究。復合佐劑是近年來佐劑研究的新熱點,由于一些疫苗佐劑單獨作用效果并不理想,而將多種疫苗佐劑復合使用以后卻能達到讓人滿意的效果,因此關于復合佐劑的研究也不斷深入。
6、本研究中,分別使用已經得到廣泛運用的鋁佐劑以及實驗中制備的氫氧化鋅膠體佐劑,與ATP制備得到復合佐劑,再迸一步研究復合佐劑與鋁、鋅佐劑單獨作用的效果差異。實驗中,以人用狂犬病疫苗作為抗原,分別設置不添加佐劑的抗原對照組、僅添加鋁、鋅佐劑的單獨佐劑組和分別添加了ATP氫氧化鋁佐劑和ATP氫氧化鋅佐劑的復合佐劑組,對ICR小鼠進行免疫,在初次免疫后不同時間段通過問接ELISA法檢測小鼠血清中抗狂犬病病毒IgG的滴度進行免疫效果評價。體液免疫
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