馬鈴薯甲蟲(chóng)熱激蛋白基因hsp60、hsp70和hsp90的克隆及溫度脅迫下的表達(dá).pdf_第1頁(yè)
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1、馬鈴薯甲蟲(chóng)Leptinotarsa decemlineata(Say)是一種抗逆性極強(qiáng)的國(guó)際性檢疫害蟲(chóng),對(duì)溫度脅迫具有很強(qiáng)的適應(yīng)性。為了明確馬鈴薯甲蟲(chóng)溫度脅迫適應(yīng)性的分子生態(tài)機(jī)制,本研究采用生物信息學(xué)手段結(jié)合RT-PCR和RACE技術(shù),對(duì)馬鈴薯甲蟲(chóng)HSP60、HSP70和HSP90基因的全長(zhǎng)cDNA序列進(jìn)行了克隆與序列分析,并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了溫度脅迫后Ld-hsp60和Ld-hsp90的相對(duì)表達(dá)量。主要研究結(jié)果如下:

2、r>　　首次在馬鈴薯甲蟲(chóng)中成功克隆得到HSP90和HSP60基因的全長(zhǎng)cDNA,分別命名為L(zhǎng)d-hsp90、Ld-hsp60。cDNA序列全長(zhǎng)分別為2489bp、2234bp,其5’端非翻譯區(qū)(UTR)分別長(zhǎng)113bp、101bp,3’ UTR長(zhǎng)度分別為216bp、402bp。完整的開(kāi)放閱讀框長(zhǎng)度分別為2160bp、1731bp,分別編碼719、576個(gè)氨基酸。氨基酸序列分別具有HSP90、HSP60家族典型的高度保守的特征序列。

3、>　　獲得了3個(gè)HSP70基因的全長(zhǎng)cDNA序列,分別為2199bp的Ld-hsp70a、2397bp的Ld-hsp70b和2482bp的Ld-hsp70c。其5’UTR分別長(zhǎng)92bp、132bp、289bp,3’UTR長(zhǎng)度分別為160bp、291bp、203bp。完整的開(kāi)放閱讀框長(zhǎng)度分別為1947bp、1974bp、1890bp,分別編碼648、657和629個(gè)氨基酸。三者的氨基酸序列一致性為71.50％。氨基酸序列均含有HSP70家

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