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文檔簡介
1、選用5株腸源乳酸桿菌和1株商用乳酸桿菌LGG以與1株腸源枯草芽孢桿菌作為研究對象,對其抗逆性和產(chǎn)酶產(chǎn)酸力及其在豬、鼠中的應用效果進行研究。
1.以5株腸源乳酸桿菌和1株商用乳酸桿菌LGG為對象,研究其抗逆性和產(chǎn)酸力。結(jié)果顯示:各菌株對外界因子的耐受性存在一定的差異。菌株LGG生長速度、產(chǎn)酸力、耐酸性都較其它菌株好,但其耐高溫能力較差,在65℃處理10min時存活率只有0.2%;菌株ZJ614耐高溫能力較強,在65℃處理20
2、min存活率仍能達到19.2%,但在50mg/L,的Cu離子中培養(yǎng)12h,其菌液OD600值僅為0.55,說明其對Cu離子較敏感;菌株ZJ621雖對酸的耐受性較強,但對膽鹽較為敏感,在0.1%的膽鹽濃度下,培養(yǎng)8h存活率僅為6.7%;菌株ZJ623雖有較好的生產(chǎn)特性,但是其耐酸性更易受時間的影響,培養(yǎng)4h和8h對其存活率影響較大,說明其穩(wěn)定性相對較差;經(jīng)綜合評價,篩選出了2株生長特性、體外環(huán)境耐受性較好的菌株ZJ610和ZJ617。
3、r> 2.以1株腸源枯草芽孢桿菌為對象,研究其抗逆性和產(chǎn)酶力。結(jié)果顯示:①菌株在pH3.0的營養(yǎng)肉湯中6h后,存活率仍能達到47.5%;②在膽鹽濃度為0.3%的營養(yǎng)肉湯中8h后,存活率仍能達到40.4%;③在90℃下,處理20min后存活率仍能達到33.3%;④當Cu離子和Zn離子濃度為500mg/L時,菌株生長量相當于對照的107.6%和86.7%;⑤菌株培養(yǎng)48h后上清的蛋白酶和淀粉酶活性分別為655.2U和1.89U。
4、> 3.選用篩選出的2株腸源乳酸桿菌ZJ610和ZJ617和1株腸源枯草芽孢桿菌進行斷奶仔豬飼養(yǎng)試驗。將270頭杜×長×大斷奶仔豬隨機分為3個處理組,分別為對照組、有抗生素組、混合益生菌組。結(jié)果顯示:①在斷奶仔豬日糧添加混合益生菌后,與對照組相比,末重、日增重分別提高了0.7%、1.7%,日均耗料、料重比分別降低6.0%、7.7%,差異不顯著;與無抗生素組相比,末重、日均耗料、日增重分別降低了3.8%、6.7%、8.0%,料重比提
5、高1.7%,差異不顯著。腹瀉指數(shù)方面,對照組最高達到2.97%,混合益生菌和抗生素組分別為2.26%和2.24%。②不同處理組糞樣DGGE圖譜的條帶數(shù)存在一定變化,混合益生菌組條帶數(shù)(52.2±5.8)多于抗生素組(48.0±5.6),少于對照組(57.2±2.9),差異不顯著(P>0.05);對照組較抗生素組條帶數(shù)高出19.2%,達到顯著性水平(P<0.05);混合益生菌組多樣性指數(shù)(1.70±0.05)高于抗生素組(1.66±0.0
6、5),低于對照組(1.74±0.02),差異不顯著(P>0.05),另外,對照組較抗生素組多樣性指數(shù)高4.8%,達到顯著性水平(P<0.05)。③混合益生菌組的細胞因子IL-6、IL-10、IL-12含量最高,對照組最低,三個處理組之間差異達到極顯著水平(P<0.01);TNF-α含量抗生素組明顯高于對照組和混合益生菌組,且達到極顯著水平(P<0.01),但混合益生菌組和對照組之間差異不顯著(P>0.05)。
4.選用篩選
7、出的2株腸源乳酸桿菌ZJ610和ZJ617和1株腸源枯草芽孢桿菌進行小鼠灌胃試驗。取6周齡BALB/C雌性小鼠48只,于正飼期每天早上灌服不同處理的10%的脫脂奶粉0.5ml,連續(xù)灌服14d。其中E-coliO157:H7攻毒組E、F、G、H于試驗第0d、7d攻毒,攻毒劑量為0.5ml/只含E-coliO157:H7108cfu/ml的10%脫脂奶粉。結(jié)果顯示:①各處理組小鼠日均耗料量和體重隨試驗天數(shù)的增加而有逐漸增多的趨勢,但各組之間
8、差異不明顯。②未攻毒組:對照組條帶數(shù)最多為(54.67±5.03),乳酸桿菌組條帶數(shù)最少為(41.00±6.08),各組之間沒有顯著差異(P>0.05);多樣性指數(shù)對照組組最高為(1.69±0.05),乳酸桿菌組和混合菌組多樣性指數(shù)最低,都為(1.56±0.06),各組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。⑧攻毒組:攻毒乳酸菌組條帶數(shù)最多為(48.00±11.14),攻毒枯草芽孢桿菌組條帶數(shù)最少為(34.00±7.00),各組之間沒有顯著
9、差異(P>0.05);多樣性指數(shù)攻毒乳酸菌組最高為(1.66±0.10),攻毒對照組多樣性指數(shù)最少為(1.56±0.06),各組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。④與對照組相比,添加乳酸桿菌和枯草芽孢桿菌及其混合菌,對小鼠血清中IL6、IL10、IL12、TNF-α沒有顯著性影響(P>0.05);經(jīng)E-coliO157:H7攻毒,以上指標與未攻毒組比也沒有顯著性差異(P>0.05);但經(jīng)攻毒后,TNF-α較未灌胃益生菌組均有提高。較對
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