激素處理對小鼠植入前胚胎發(fā)育及胚胎冷凍解凍效果的影響.pdf

1、小鼠是胚胎工程研究中常用的動物之一，同時，小鼠還是基因功能和人類疾病研究常用的模型動物。為了進一步拓展研究領(lǐng)域，同時為家畜育種提供一個可資參考的技術(shù)體系，建立高效的小鼠胚胎操作平臺是本實驗室近期的主要目標之一。本試驗通過對小鼠腹腔注射不同劑量超排激素（5IU PMSG+5IU HCG和10IU PMSG+10IU HCG），觀察了對小鼠植入前胚胎發(fā)育、胚胎冷凍解凍效果及卵巢組織和血清中蛋白成分變化的影響，這些數(shù)據(jù)的積累能為本實驗室建立高

2、效的小鼠胚胎操作平臺奠定基礎(chǔ)。
　　 實驗首先篩選了最適合昆白小鼠胚胎發(fā)育的培養(yǎng)液。小鼠胚胎分別培養(yǎng)在KSOM、M16、CZB三種培養(yǎng)液中，4天之后觀察囊胚率，各組之間差異顯著（分別為75.94％、46.07％、63.93％，P＜0.05），KSOM發(fā)育率明顯高于其他兩組。因此隨后的實驗均采用KSOM作為培養(yǎng)液。其次在含有不同濃度的?；撬幔?mM、2.5 mM、5mM、10mM、50 mM）的KSOM中培養(yǎng)小鼠胚胎，4天后觀察囊

3、胚率，各處理組差異并不顯著(分別為75.76％、77.45％、73、56％、73.06％、71.78％，P＞0.05)，因此以后的KSOM中不添加?；撬帷Ｗ詈笫褂貌煌瑵舛燃に?5IU PMSG+5IU HCG和10IUPMSG+10IU HCG)對小鼠進行超排，觀察囊胚發(fā)育情況(囊胚率分別為76.45％、67.08％，P＜0.05)，各處理組差異顯著。
　　 在使用不同劑量激素（5IU PMSG+5IU HCG和10IU PMS

4、G+10IU HCG）對小鼠進行超排后，運用時間飛行質(zhì)譜分別檢測不同處理樣品的蛋白含量差異。對照組存在特異表達蛋白gi19116236，5IU PMSG+5IU HCG處理組存在特異表達蛋白gi19116236和gi148669394，10IU PMSG+10IU HCG處理組中沒有檢測出特異蛋白。gi19116236和gi148669394兩種蛋白的結(jié)構(gòu)和功能尚不清楚;經(jīng)不同激素處理后在卵巢樣品檢測中并未發(fā)現(xiàn)特異蛋白。
　　

5、在使用不同劑量激素（5IU PMSG+5IU HCG和10IU PMSG+10IU HCG）對小鼠進行超排后，將獲得胚胎進行冷凍解凍，10IU激素組合胚胎復(fù)蘇率和囊胚率高于5IU且差異顯著(86.03％、73.63％VS82.93％、67.95％，P＜0.05)。
　　 總之，本研究結(jié)果說明在KSOM胚胎培養(yǎng)液較適合昆白小鼠植入前胚胎培養(yǎng);5IU PMSG+5IU HCG超排激素組合較適合小鼠植入前胚胎發(fā)育;10IU PMSG+