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文檔簡介
1、精原干細胞(SSCs)是維持雄性生殖能力的重要資源,也是精子發(fā)生的基礎。精原干細胞移植為研究精子發(fā)生、雄性生殖能力及新型轉基因技術奠定了基礎。受體制備是SSCs移植技術的重要組成部分,也是SSCs成功移植的必要條件和前提基礎,受體制備效率直接關系到移植效果。因操作方法簡便,腹腔注射白消安一直是本研究領域中一種較為常用的方法,但白消安的副作用較大,嚴重時會引起動物死亡,影響了該方法的臨床應用與發(fā)展。本研究通過直接向小鼠靶器官睪丸注射白消安
2、來制備受體,同時以傳統(tǒng)的腹腔注射作為對照,以50% DMSO睪丸注射作為空白對照,觀察經(jīng)不同途徑給藥后各組小鼠在不同時間點各項生殖生理指標(死亡率、體重和睪丸重、血象、精子數(shù)、曲細精管、GDNF、生育能力)的變化情況,分析不同給藥途徑對受體制備效果的影響。
本研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)睪丸給藥的小鼠沒有出現(xiàn)死亡,而經(jīng)腹腔給藥后三組小鼠分別出現(xiàn)18%、39.3%、42.7%的死亡率。檢測小鼠血常規(guī)發(fā)現(xiàn),腹腔對照組小鼠除平均紅細胞血紅蛋白濃度
3、(MCHC)無明顯變化外,紅細胞數(shù)(RBC)、血紅蛋白數(shù)(HGB)、白細胞(WBC)、血小板(PLT)均明顯下降。而睪丸注射各組小鼠的RBC、HGB、MCHC均未發(fā)生明顯變化,WBC、PLT數(shù)有所下降,但下降程度比腹腔對照組小,且各項血液指標均較快恢復到正常水平。40mg/kg劑量腹腔注射和6、8、10mg/kg劑量睪丸注射能夠使受體曲細精管完全中空,而4mg/kg劑量不能使受體睪丸曲細精管內(nèi)的生精細胞完全耗竭。雖然8mg/kg和10m
4、g/kg劑量睪丸注射能夠使曲細精管完全中空,但會造成睪丸硬化,恢復緩慢,甚至不能恢復。精子數(shù)、相對睪丸重量、GDNF水平會隨著曲細精管內(nèi)的變化發(fā)生相應改變。此外,經(jīng)腹腔和睪丸注射白消安均會造成小鼠的短期不育,但這種不孕均可恢復,且睪丸注射比腹腔注射恢復速度更快。白消安在一定時期內(nèi)雖然會對小鼠的生育能力造成影響,但不影響其后代性別比例。
本研究以小鼠為模型,證明了雙側睪丸注射白消安對動物機體毒害作用顯著低于腹腔注射,可以用于
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