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1、分類(lèi)號(hào):Q78學(xué)校單位代碼:10446碩士學(xué)位論文論文題目:論文題目:泰山蟲(chóng)草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究泰山蟲(chóng)草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究泰山蟲(chóng)草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究泰山蟲(chóng)草多基因分子系統(tǒng)學(xué)研究研究生姓名:趙品蒼學(xué)科、專(zhuān)業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:分子生物學(xué)導(dǎo)師姓名、職稱(chēng):曲志才教授論文完成時(shí)間:2012年4月曲阜師范大學(xué)2009級(jí)研究生畢業(yè)論文I摘要蟲(chóng)草屬隸屬麥角菌科(Clavicipitaceae)、肉座菌目(Hypocreales)、核
2、菌綱(Pyrenomucetes)、子囊菌門(mén)(omycota),廣布于全世界。最新的分類(lèi)學(xué)將其分為三個(gè)科蟲(chóng)草科(Cdycipitaceae)、麥角菌科(Clavicipitaceae)、蛇形蟲(chóng)草科(Ophiocdycipitaceae)四個(gè)屬(Cdyceps、Metacdyceps、Elaphocdyceps、Ophiocdyceps)。本文主要以野生泰山蟲(chóng)草的子實(shí)體為材料,以Tef1α、βtub、nrSSU、nrLSU基因的部分序列和
3、rDNAITS序列為分子標(biāo)記,運(yùn)用同源性分析、系統(tǒng)進(jìn)化分析、遺傳距離分析等方法探討泰山蟲(chóng)草的分類(lèi)地位以及與其它蟲(chóng)草的親緣關(guān)系,并對(duì)功能基因進(jìn)行F分析,以期為泰山蟲(chóng)草的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用提供相關(guān)的理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:1.以泰山蟲(chóng)草基因組DNA為模板,用蟲(chóng)草通用引物和一條新設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)增出五個(gè)目的片段,經(jīng)回收、克隆、測(cè)序后提交到NCBI數(shù)據(jù)庫(kù),得到的登錄號(hào)分別為:βtub(JN547406)、Tef1α(JN547405)、nrSSUITSnr
4、LSU(JN411084),2012年10月以后釋放。2.以Tef1α、βtub、nrSSU、nrLSU、rDNAITS序列為分子標(biāo)記,分別進(jìn)行同源性分析,結(jié)果表明泰山蟲(chóng)草、九州蟲(chóng)草、蛹蟲(chóng)草三者之間相似性在99%以上,據(jù)此難以區(qū)分哪兩者之間的親緣關(guān)系更近;單基因系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果也顯示這三種蟲(chóng)草始終聚在一起。提示了這三者之間在分類(lèi)地位上的一致性,應(yīng)同歸為蟲(chóng)草科。3.以Tef1α、βtub、nrSSU、nrLSU為分子標(biāo)記進(jìn)行的遺傳距離分析
5、結(jié)果顯示泰山蟲(chóng)草和九州蟲(chóng)草的親緣關(guān)系更近,兩者之間的遺傳距離和標(biāo)準(zhǔn)誤差均為0.000;nrSSUnrLSUTef1α三基因綜合數(shù)據(jù)的系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果表明泰山蟲(chóng)草和九州蟲(chóng)草始終聚在一起,然后與蛹蟲(chóng)草聚在一起。結(jié)合同源性分析結(jié)果,可以推斷泰山蟲(chóng)草和九州蟲(chóng)草為同物異名。4.運(yùn)用光學(xué)顯微鏡及石蠟切片技術(shù)對(duì)泰山蟲(chóng)草子實(shí)體的顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,并對(duì)其表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行電子顯微鏡掃描觀察。結(jié)果顯示,供試材料子囊殼的排列方式和包埋情況與文獻(xiàn)所描述的九州蟲(chóng)草和蛹
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