致病性副溶血弧菌脂多糖對牙鲆的免疫效應及其抗原性研究.pdf

1、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)是一種海水中常見的條件致病菌,可引起海水養(yǎng)殖魚類疾病.脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革蘭氏陰性細菌外膜的主要成分,是細菌中毒最主要的內(nèi)毒素.鰻弧菌、溶藻弧菌脂多糖對魚類的致病致死作用已有諸多研究,但副溶血弧菌脂多糖的致病致死作用尚無研究.研究致病性副溶血弧菌脂多糖在牙鲆中的免疫效應,尋找防治副溶血弧菌病的方法,對牙鲆的健康生產(chǎn)具有重要的指導作用.

2、該研究利用酚水法提取副溶血弧菌脂多糖.進行急性毒性試驗測定脂多糖在48h對牙鲆的半致死濃度(LC50),實驗結果表明脂多糖注射量為0.2ml,48h的半致死濃度為126mg·ml<'-1>,注射劑量在40mg·kg<'-1>時不會對牙鲆造成傷害.用此濃度脂多糖做免疫原,采用加強腹腔注射法免疫牙鲆,利用免疫試管;凝集法測定牙鲆的血清凝集抗體效價,研究牙鲆在脂多糖免疫后特異性的免疫應答規(guī)律.結果表明,免疫后的牙鲆對副溶血弧菌的血清凝集抗體效

3、價有顯著提高,第3周抗體滴度達到最高值256.該研究測定了脂多糖免疫后牙鲆白細胞吞噬活性的變化和病原菌攻毒后牙鲆的存活率.結果表明,脂多糖免疫后在不同的時間,牙鲆白細胞的吞噬活性沒有明顯差別,但與對照組相比有明顯加強(P<0.05).用致病副溶血弧菌攻毒免疫脂多糖后的牙鲆的結果表明,脂多糖對牙鲆的保護率為62.5﹪.該研究又以聚丙烯酰胺凝膠電泳法分析了脂多糖中的蛋白質(zhì)成分,經(jīng)SDS-PAGE電泳及銀染色后表明副溶血弧菌脂多糖含有41.3