AFLP技術(shù)和線(xiàn)粒體序列分析在我國(guó)巨蠣屬牡蠣系統(tǒng)分類(lèi)中的應(yīng)用.pdf

1、擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)(AFLP)是基于選擇性擴(kuò)增完全酶切消化后的基因組DNA片段.該技術(shù)的運(yùn)用不需要預(yù)知基因組的序列特征,具有較高的多態(tài)分辨力,可適用于任何來(lái)源和各種復(fù)雜度的DNAs.AFLP技術(shù)被廣泛地運(yùn)用到動(dòng)物分子生物學(xué)的研究中.該文利用簡(jiǎn)化的AFLP技術(shù)從基因水平上對(duì)太平洋牡蠣、大連灣牡蠣、褶牡蠣和近江牡蠣進(jìn)行了初步分類(lèi)鑒定和遺傳多樣性分析,探討了AFLP技術(shù)在牡蠣系統(tǒng)分類(lèi)學(xué)上的應(yīng)用.在16種引物中,篩選了8種引物對(duì)四種牡蠣的D

2、NA進(jìn)行擴(kuò)增均得到1-10個(gè)大小不等的DNA片段,長(zhǎng)度大部分在500-2000bp之間.此外,還得到了4條特異性標(biāo)記(太平洋2條,大連灣和近江牡蠣各1條),可作為種的鑒定.數(shù)據(jù)處理參照RAPD標(biāo)記的數(shù)據(jù)分析方法,計(jì)算了四種牡蠣群內(nèi)遺傳多樣性參數(shù)和種間的遺傳距離.DNA序列分析是檢測(cè)DNA水平多態(tài)性最精確的方法,鑒于中國(guó)沿岸幾種常見(jiàn)牡蠣分類(lèi)比較混亂的現(xiàn)狀,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增了大連、青島、寧波和廈門(mén)4個(gè)不同地理位置的常見(jiàn)牡蠣16S核糖體RN